@article{DuschlJahnBertlingetal.1992,
  author    = {Duschl, Albert and Jahn, Ute and Bertling, Claudia and Sebald, Walter},
  title     = {A comparison of assays for the response of primary human T-cells upon stimulation with interleukin-2, interleukin-4 and interleukin-7},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-86750},
  year      = {1992},
  abstract  = {The most commonly used assay to quantitate the response of peripheral T~cells upon stimulation with growth factors is determination of incorporated (JH]TdR. We compared thls test to three other methods: 1. direct countlog of cells with a Coulter type counter as reference assay, 2. a colorimetric assay using the tetrazolium dye 3-[ 4,S-dimethylthiazol-l-yl]-2,5diphenyl tetrazolium (MTT), which is a cheap and increasingly popular non-radioactive method and 3. incorporation of the thymidine analog 5-bromo-2'-deoxyuridine detection with a monoclonal antibody on cytospins. Primary human PHA-blasts from >30 healthy individuals were stimulated with IL-2, IL-4 aod IL-7 and assayed with up to four different methods. We discuss the advantages and disadvantages of the assays used and tbe effects of differences between cell preparations. We observed no significant variations between individuals for the dose dependence, but the relative emctency of IL4 compared to IL-2 and IL-7 was variable. This was probably due to the slower response observed upon stimulation with this factor.},
  subject      = {T-Lymphozyt},
  language  = {en}
}
@phdthesis{Feldmann2002,
  author    = {Feldmann, Kristina},
  title     = {Signal transduction of transforming growth factor-Beta in cytotoxic T cells},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-4912},
  school      = {Universit{\"a}t W{\"u}rzburg},
  year      = {2002},
  abstract  = {Transforming-Growth-Factor-beta1 (TGF-b1) ist ein multifunktionelles Zytokin, welches insbesondere Zellwachstum und Zelldifferenzierung koordiniert. TGF-b ist vor allem daf{\"u}r bekannt, Zellen des Immunsystems zu beeinflussen. TGF-b steuert zum Beispiel die Differenzierung von T-Zellen und und deren Effektorfunktionen. Die Signaltransduktion von TGF-b wird vermittelt durch die Phosphorylierung von Rezeptor-assoziierten Smad-Proteinen (R-Smads). R-Smads werden vom Typ I Rezeptor aktiviert, der seinerseits vom hochaffinen Typ II Rezeptor phosphoryliert wird, sobald der Ligand bindet. Die phosphorylierten RSmads assoziieren darauf mit Co-Smads. Heterooligomere von R-Smads und Co-Smads wandern dann in den Zellkern, wo sie im Zusammenspiel mit Transkriptionsfaktoren wie CBP/p300 oder AP-1 die Transkription TGF-b-spezifischer Zielgene koordinieren. Neue Erkenntnisse lassen vermuten, daß die pleiotropen Effekte von TGF-b durch das Interagieren mit anderen Signalkaskaden entstehen, zum Beispiel mit dem MAP-Kinase-Weg oder der STAT-Kaskade. Wir beschreiben hier den Effekt von TGF-b auf die Effektorfunktionen unterschiedlich stimulierter prim{\"a}rer Maus-Milzzellen und aufgereinigten zytotoxischen CD8+ Maus-TZellen. Langzeitbehandlung mit TGF-b resultierte in der Unf{\"a}higkeit der Zellen, Smad2 ligandeninduziert zu phosphorylieren. Entweder wurde {\"u}berhaupt keine Phosphorylierung beobachtet, oder eine anhaltende Phosphorylierung von Smad2 unabh{\"a}ngig vom Vorhandensein des Liganden. Des weiteren stellten wir einen Zusammenhang zwischen anhaltender Smad2-Phosphorylierung und der Resistenz gegen{\"u}ber TGF-b induzierter Wachstumshemmung fest. Im Gegensatz dazu zeigen Zellen, die sensitiv sind gegen{\"u}ber TGF-b vermittelter Wachstumshemmung, keine Smad2-Phosphorylierung mehr. Bez{\"u}glich ihrer zytotoxische Aktivt{\"a}t waren allerdings beide Ph{\"a}notypen nicht mehr lytisch wirksam, unabh{\"a}ngig von der jeweiligen Smad2-Phosphorylierung. In dieser Arbeit zeigen wir auch die Notwendigkeit eines funktionalen MEK-1-Signalweges auf, der unabdingbar ist, damit TZellen keine Wachstumsinhibierung durch TGF-b mehr erfahren. Das Blockieren dieses Signalweges f{\"u}hrt dar{\"u}berhinaus bei diesen Zellen ebenfalls zu einem ver{\"a}nderten Smad2- Phosphorylierungsmuster. Bez{\"u}glich des JNK-Signalweges konnten wir feststellen, daß ein funktional aktiver JNK-Signalweg mit der Resistenz gegen{\"u}ber TGF-b vermittelter Wachstumsinhibierung einhergeht. Allerdings f{\"u}hrt die Zugabe von IFNg und/oder aCD28- Antik{\"o}rper nicht zu einer ver{\"a}nderten Sensitivit{\"a}t gegen{\"u}ber TGF-b. Im Gegensatz zuprim{\"a}ren Zellen k{\"o}nnen die beschriebenen Zusammenh{\"a}nge in Zellkulturen vom humanen und murinen T Zellen nicht beobachtet werden, und sind somit spezifisch f{\"u}r primare TZellen. Wir beschreiben auch die Klonierung eines chim{\"a}ren dominant-negativen Typ II Rezeptors, der an eine Kinase gekoppelt ist, die bei Aktivierung Zelltod ausl{\"o}st. Damit soll es in Zukunft m{\"o}glich sein, T-Zellen gegen{\"u}ber TGF-b Resistenz zu verleihen. Die hier geschilderten Ergebnisse vertiefen die Kenntnisse {\"u}ber molekulare Mechanismen der Wirkung von TGF-b auf T-Zellen und k{\"o}nnen vielleicht dazu beitragen, negative Effekte von TGF-b, zum Beispiel in der Tumortherapie, gezielt abzuwenden.},
  subject      = {T-Lymphozyt},
  language  = {en}
}
@article{KarulinCaspellDittrichetal.2015,
  author    = {Karulin, Alexey Y. and Caspell, Richard and Dittrich, Marcus and Lehmann, Paul V.},
  title     = {Normal distribution of CD8+ T-cell-derived ELISPOT counts within replicates justifies the reliance on parametric statistics for identifying positive responses},
  series = {Cells},
  volume    = {4},
  journal   = {Cells},
  number    = {1},
  doi       = {10.3390/cells4010096},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-149968},
  pages     = {96-111},
  year      = {2015},
  abstract  = {Accurate assessment of positive ELISPOT responses for low frequencies of antigen-specific T-cells is controversial. In particular, it is still unknown whether ELISPOT counts within replicate wells follow a theoretical distribution function, and thus whether high power parametric statistics can be used to discriminate between positive and negative wells. We studied experimental distributions of spot counts for up to 120 replicate wells of IFN-γ production by CD8+ T-cell responding to EBV LMP2A (426 - 434) peptide in human PBMC. The cells were tested in serial dilutions covering a wide range of average spot counts per condition, from just a few to hundreds of spots per well. Statistical analysis of the data using diagnostic Q-Q plots and the Shapiro-Wilk normality test showed that in the entire dynamic range of ELISPOT spot counts within replicate wells followed a normal distribution. This result implies that the Student t-Test and ANOVA are suited to identify positive responses. We also show experimentally that borderline responses can be reliably detected by involving more replicate wells, plating higher numbers of PBMC, addition of IL-7, or a combination of these. Furthermore, we have experimentally verified that the number of replicates needed for detection of weak responses can be calculated using parametric statistics.},
  language  = {en}
}