@article{GaoNagpalSchneideretal.2015,
  author    = {Gao, Shiqiang and Nagpal, Jatin and Schneider, Martin W. and Kozjak-Pavlovic, Vera and Nagel, Georg and Gottschalk, Alexander},
  title     = {Optogenetic manipulation of cGMP in cells and animals by the tightly light-regulated guanylyl-cyclase opsin CyclOp},
  series = {Nature Communications},
  volume    = {6},
  journal   = {Nature Communications},
  number    = {8046},
  doi       = {10.1038/ncomms9046},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-148197},
  year      = {2015},
  abstract  = {Cyclic GMP (cGMP) signalling regulates multiple biological functions through activation of protein kinase G and cyclic nucleotide-gated (CNG) channels. In sensory neurons, cGMP permits signal modulation, amplification and encoding, before depolarization. Here we implement a guanylyl cyclase rhodopsin from Blastocladiella emersonii as a new optogenetic tool (BeCyclOp), enabling rapid light-triggered cGMP increase in heterologous cells (Xenopus oocytes, HEK293T cells) and in Caenorhabditis elegans. Among five different fungal CyclOps, exhibiting unusual eight transmembrane topologies and cytosolic N-termini, BeCyclOp is the superior optogenetic tool (light/dark activity ratio: 5,000; no cAMP production; turnover (20 °C) ~17 cGMPs\(^{-1}\)). Via co-expressed CNG channels (OLF in oocytes, TAX-2/4 in C. elegans muscle), BeCyclOp photoactivation induces a rapid conductance increase and depolarization at very low light intensities. In O\(_2\)/CO\(_2\) sensory neurons of C. elegans, BeCyclOp activation evokes behavioural responses consistent with their normal sensory function. BeCyclOp therefore enables precise and rapid optogenetic manipulation of cGMP levels in cells and animals.},
  language  = {en}
}
@article{ZhouDingDuanetal.2021,
  author    = {Zhou, Yang and Ding, Meiqi and Duan, Xiaodong and Konrad, Kai R. and Nagel, Georg and Gao, Shiqiang},
  title     = {Extending the Anion Channelrhodopsin-Based Toolbox for Plant Optogenetics},
  series = {Membranes},
  volume    = {11},
  journal   = {Membranes},
  number    = {4},
  issn      = {2077-0375},
  doi       = {10.3390/membranes11040287},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-236617},
  year      = {2021},
  abstract  = {Optogenetics was developed in the field of neuroscience and is most commonly using light-sensitive rhodopsins to control the neural activities. Lately, we have expanded this technique into plant science by co-expression of a chloroplast-targeted β-carotene dioxygenase and an improved anion channelrhodopsin GtACR1 from the green alga Guillardia theta. The growth of Nicotiana tabacum pollen tube can then be manipulated by localized green light illumination. To extend the application of analogous optogenetic tools in the pollen tube system, we engineered another two ACRs, GtACR2, and ZipACR, which have different action spectra, light sensitivity and kinetic features, and characterized them in Xenopus laevis oocytes, Nicotiana benthamiana leaves and N. tabacum pollen tubes. We found that the similar molecular engineering method used to improve GtACR1 also enhanced GtACR2 and ZipACR performance in Xenopus laevis oocytes. The ZipACR1 performed in N. benthamiana mesophyll cells and N. tabacum pollen tubes with faster kinetics and reduced light sensitivity, allowing for optogenetic control of anion fluxes with better temporal resolution. The reduced light sensitivity would potentially facilitate future application in plants, grown under low ambient white light, combined with an optogenetic manipulation triggered by stronger green light.},
  language  = {en}
}
@phdthesis{Claes2003,
  author    = {Claes, Ellen},
  title     = {Einfluss funktionsloser Photorezeptoren auf die Anatomie der Retina - Eine licht- und elektronenmikroskopische Studie anhand der CNGA3-/-Rho-/- Maus},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-8181},
  school      = {Universit{\"a}t W{\"u}rzburg},
  year      = {2003},
  abstract  = {Netzhauterkrankungen, wie Retinitis pigmentosa, sind in der Bev{\"o}lkerung weit verbreitet (1,5 Millionen weltweit). Gew{\"o}hnlich berichten die Betroffenen {\"u}ber Nachtblindheit und periphere Gesichtsfeldausf{\"a}lle. H{\"a}ufig f{\"u}hrt diese Erkrankung, die durch eine fortschreitende Degeneration von Photorezeptoren verursacht wird, zur vollst{\"a}ndigen Erblindung. Bisher beschrieb man den pathologischen Prozess vor allem an rd-M{\"a}usen. Allerdings setzt bei diesen die Degeneration sehr fr{\"u}h ein. Somit ist die {\"U}bertragbarkeit auf den Menschen erschwert, da abgesehen von wenigen Ausnahmen, der Verlust von Photorezeptoren hier erst im zweiten Lebensabschnitt beginnt. Deshalb war es interessant, im Rahmen dieser Arbeit anhand der CNGA3-/-Rho-/- Maus ein Modell zu untersuchen, das {\"a}hnlich dem menschlichen System, zun{\"a}chst eine intakte Morphologie zeigt. Dadurch war es m{\"o}glich eine genaue zeitliche Abfolge der Degeneration zu dokumentieren. Dies kann medizinisch zur Entwicklung eines Therapieansatzes genutzt werden, der bereits zu Beginn der Degeneration greift, und damit den fortlaufenden Prozess zum Stillstand bringen kann. Die CNGA3-/-Rho-/- Maus repr{\"a}sentiert ein System funktionsloser Photorezeptoren, bei dem der zyklische Nukleotid-Kanal (CNGA3) der Zapfenaußensegmente und das Rhodopsin (Rho) der St{\"a}bchenaußensegmente ausgeschaltet wurde. Best{\"a}tigt wurde dies durch ein Elektroretinogramm mit einer negativen Photoantwort bez{\"u}glich Zapfen und St{\"a}bchen. Die Degeneration f{\"u}hrt zu einem vollst{\"a}ndigen Verlust aller Photorezeptoren nach drei Monaten (Pm3). Zum Zeitpunkt Pw4 konnte, vergleichbar dem Wildtyp, eine intakte {\"a}ußere Retina nachgewiesen werden, bei der lediglich die {\"a}ußeren St{\"a}bchensegmente fehlen. Die synaptischen Kontakte zwischen den Terminalien der Photorezeptoren, der Horizontalzellen und Bipolarzelldendriten waren normal entwickelt und St{\"a}bchenendigungen als auch Zapfenendf{\"u}ßchen bildeten funktionelle Triaden aus. Bei den St{\"a}bchenendigungen konnte mit zunehmender Degeneration (Pw5, Pw6) eine Akkumulation synaptischer B{\"a}nder und postsynaptischer Elemente beobachtet werden. Im Zeitraum Pw4-7 zeigten sowohl die Zapfen, als auch die Horizontalzellen und St{\"a}bchen-Bipolarzellen, eine bemerkenswerte strukturelle Plastizit{\"a}t. Obwohl durch die Photorezeptoren kein Lichtsignal vermittelt wurde, konnten pr{\"a}synaptische Marker (bassoon) und postsynaptische Glutamatrezeptoren (GluR1, mGluR6) an den Photorezeptorterminalien nachgewiesen werden. Dies l{\"a}sst die Vermutung zu, dass eine Transmitterfreisetzung theoretisch m{\"o}glich w{\"a}re. Dar{\"u}ber hinaus konnte im Zeitraum von 12 Monaten keine nennenswerte Auswirkung auf die IPL beobachtet werden: Amakrin- und Zapfen-Bipolarzellen waren normal stratifiziert und die Expression der Transmitter-Rezeptoren zeigte ein charakteristisches Verteilungsmuster. Außerdem war die Ultrastruktur von konventionellen und Bandsynapsen der des Wildtyps vergleichbar. Dar{\"u}ber hinaus bildeten sowohl Amakrinzellen, als auch Bipolar- und Ganglienzellen, Forts{\"a}tze in die INL hinein. Allgemein zeigt die immunhistochemisch und ultrastrukturell untersuchte CNGA3-/-Rho-/- Maus, dass weder funktionell aktive Photorezeptoren noch Licht eine stimulierende Wirkung auf die Ausbildung synaptischer Strukturen und die Expression verschiedener Rezeptoren haben.},
  subject      = {Netzhaut},
  language  = {de}
}
@article{TianNagelGao2021,
  author    = {Tian, Yuehui and Nagel, Georg and Gao, Shiqiang},
  title     = {An engineered membrane-bound guanylyl cyclase with light-switchable activity},
  series = {BMC Biology},
  volume    = {19},
  journal   = {BMC Biology},
  number    = {1},
  doi       = {10.1186/s12915-021-00978-6},
  url       = {http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:20-opus-259181},
  pages     = {54},
  year      = {2021},
  abstract  = {Background Microbial rhodopsins vary in their chemical properties, from light sensitive ion transport to different enzymatic activities. Recently, a novel family of two-component Cyclase (rhod)opsins (2c-Cyclop) from the green algae Chlamydomonas reinhardtii and Volvox carteri was characterized, revealing a light-inhibited guanylyl cyclase (GC) activity. More genes similar to 2c-Cyclop exist in algal genomes, but their molecular and physiological functions remained uncharacterized. Results Chlamyopsin-5 (Cop5) from C. reinhardtii is related to Cr2c-Cyclop1 (Cop6) and can be expressed in Xenopus laevis oocytes, but shows no GC activity. Here, we exchanged parts of Cop5 with the corresponding ones of Cr2c-Cyclop1. When exchanging the opsin part of Cr2c-Cyclop1 with that of Cop5, we obtained a bi-stable guanylyl cyclase (switch-Cyclop1) whose activity can be switched by short light flashes. The GC activity of switch-Cyclop1 is increased for hours by a short 380 nm illumination and switched off (20-fold decreased) by blue or green light. switch-Cyclop1 is very light-sensitive and can half-maximally be activated by ~ 150 photons/nm2 of 380 nm (~ 73 J/m2) or inhibited by ~ 40 photons/nm\(^2\) of 473 nm (~ 18 J/m\(^2\)). Conclusions This engineered guanylyl cyclase is the first light-switchable enzyme for cGMP level regulation. Light-regulated cGMP production with high light-sensitivity is a promising technique for the non-invasive investigation of the effects of cGMP signaling in many different tissues.},
  language  = {en}
}