Refine
Has Fulltext
- yes (85)
Year of publication
- 2000 (85) (remove)
Document Type
- Doctoral Thesis (75)
- Journal article (3)
- Complete part of issue (2)
- Jahresbericht (1)
- Book (1)
- Book article / Book chapter (1)
- Master Thesis (1)
- Preprint (1)
Keywords
- Molekularbiologie (16)
- Apoptose (6)
- Signaltransduktion (6)
- Genexpression (5)
- apoptosis (5)
- Apoptosis (4)
- Namibia (4)
- Ratte (4)
- T-Lymphozyt (4)
- Virulenz (4)
- Zelldifferenzierung (4)
- Aktivierung <Physiologie> (3)
- B-Lymphozyt (3)
- Brustkrebs (3)
- Genregulation (3)
- Geochemie (3)
- Legionella pneumophila (3)
- Maus (3)
- Wassertransport (3)
- Würzburg (3)
- aquaporin (3)
- signal transduction (3)
- Ameisen (2)
- Antigen CD8 (2)
- Aquaporin (2)
- B-Zell-Lymphom (2)
- CD28 (2)
- CD40 (2)
- Carcinogenese (2)
- Caspasen (2)
- Geologie (2)
- Geschichte (2)
- Gondwana (2)
- Hydrogeologie (2)
- IL-4 (2)
- Invasion (2)
- Karoo (2)
- Listeria monocytogenes (2)
- MALT (2)
- Mais (2)
- Modellierung (2)
- Molekulargenetik (2)
- Parasit (2)
- Pflanzenwachstum (2)
- Proliferation (2)
- Proteasen (2)
- Reproduktion (2)
- Stofftransport <Biologie> (2)
- Systematik (2)
- Taufliege (2)
- Tuff (2)
- Universität (2)
- Wasserhaushalt (2)
- Wurzel (2)
- Zea mays (2)
- Zeitschrift (2)
- breast cancer (2)
- invasion (2)
- rat (2)
- reproduction (2)
- virulence (2)
- 1 (1)
- 16S rRNA (1)
- 18SrRNA (1)
- 25 Dihydroxyvitamin D3 (1)
- 25 dihydroxyvitamin D3 (1)
- 3D-Modellierung (1)
- 3D-modelling (1)
- 3pK (1)
- A1 (1)
- ABA (1)
- AKR-2B Fibroblasten (1)
- AKR-2B fibroblasts (1)
- ATP (1)
- Abscisic acid (1)
- Abscisinsäure (1)
- ActA (1)
- Actin (1)
- Acts of the Apostles (1)
- Adaptionsmarktplatz (1)
- Advanced Glycation Endproducts (1)
- Advanced glycation endproducts (1)
- Affinminimalfläche (1)
- Affinnormal (1)
- Agent <Informatik> (1)
- Akten Amt Römhild (1)
- Aktienrecht (1)
- Aktin-Zytoskelett (1)
- Algen (1)
- Allergie (1)
- Allergy (1)
- Allgemeine atmosphärische Zirkulation (1)
- Alloreaktion (1)
- Alpha-Methylacyl-CoA racemase (1)
- Alternative (1)
- Alternative Strategien (1)
- Alzheimer (1)
- Alzheimer-Krankheit (1)
- Aneuploidie (1)
- Anisomycin (1)
- Annual Report (1)
- Antibiotikum (1)
- Antigen (1)
- Antigen CD28 (1)
- Antigen CD44 (1)
- Antike (1)
- Antioxidantien (1)
- Anton Ulrich <Braunschweig-Lüneburg, Herzog> / Octavia (1)
- Aplysina (1)
- Aplysina caulifromis (1)
- Aplysina insularis (1)
- Apoptose-Resistenz (1)
- Apostelgeschichte (1)
- Apostelkonzil (1)
- Aquaporine (1)
- Aragonien (1)
- Archaeology (1)
- Archäologie (1)
- Assoziation (1)
- Atlantischer Ozean <Nord> (1)
- Atlantischer Ozean <Nordost> (1)
- Attenuierung (1)
- Aufsichtsrat (1)
- Auge (1)
- Ausfallstraße (1)
- Autoantikörper (1)
- Autökologie (1)
- Auxin (1)
- B cell lymphoma (1)
- B cells (1)
- B-Lymphozyten (1)
- B-Zellen (1)
- B-lymphocytes (1)
- Babuska Brezzi Bedingung (1)
- Babuska Brezzi condition (1)
- Bakterielle Infektion (1)
- Bakterien (1)
- Bakteriophagen (1)
- Barrovian sequence (1)
- Barrow-Zonen (1)
- Baumwollratte (1)
- Bavaria (1)
- Bcl-2 (1)
- Bentonit (1)
- Beratungsbetrieb (1)
- Beratungsgeschäft (1)
- Bericht (1)
- Bestimmung (1)
- Bewegliche Sache (1)
- Bewertungsanalyse (1)
- Biene (1)
- Bienenwachs (1)
- Biofilm (1)
- Biofilmbildung (1)
- Bivalven (1)
- Bivalves (1)
- Blimp-1 (1)
- Blochmannia (1)
- Blut-Hirn-Schranke (1)
- Bmi1 (1)
- Bodenbildung (1)
- Borneo (1)
- Bromoisoxazolinalkaloide (1)
- Bromorganische Verbindungen (1)
- Bromotyrosinalkaloide (1)
- Brutfürsorge (1)
- Brutpflege (1)
- Buchan-type metamorphic evolution (1)
- Buchen-type Metamorphose (1)
- Buckelzirpen (1)
- CD8 (1)
- CD8 T-Zell-Subpopulation (1)
- CD8 T-cell subpopulation (1)
- CNS (1)
- Camponotus (1)
- Candida albicans (1)
- Candida glabrata (1)
- Carboniferous (1)
- Cartilage Oligomeric Matrix Protein (1)
- Caspase (1)
- Caspases (1)
- Cassidinae (1)
- Charakterisierung (1)
- Chrysomelidae (1)
- Chrétien <de Troyes> (1)
- Common law marriage (1)
- Computersimulation (1)
- Coronaviren (1)
- Cuscuta reflexa (1)
- DCIS (1)
- DEVDase (1)
- Daughter of Sevenless (1)
- Demokratie (1)
- Deutschland (1)
- Deutschland ; Europa ; Aktiengesellschaft ; Geschichte 1838 - 2000 (1)
- Dialektologie (1)
- Diamiktit (1)
- Dielektrophorese (1)
- Dimerisierung (1)
- Dimorphismus (1)
- Diskordanz (1)
- Djebar, Assia / Les nuits de Strasbourg (1)
- Dot-Depth Problem (1)
- Dot-Depth-Hierarchie (1)
- Dreidimensionale Computergraphik (1)
- Drosophila (1)
- Druckmessung (1)
- Durchflusszytometrie (1)
- Dwyka (1)
- Dwyka Group (1)
- Dwyka Gruppe (1)
- EHEC (1)
- Edition (1)
- Eheähnliche Gemeinschaft (1)
- Eifel (1)
- Eifel <West> / Moor (1)
- Eigentum (1)
- Eigentumsverhältnisse an beweglichen Sachen (1)
- Eigenwert (1)
- Einzelhandel (1)
- Einzelhandelsbetrieb (1)
- Einzelzirkonevaporation (1)
- Eisen-III-Chlorid (1)
- Electronic commerce (1)
- Electroporation (1)
- Elektrische Eigenschaft (1)
- Elektroporation (1)
- Endosymbiont (1)
- Endosymbionten (1)
- Enterhämorrhagische Escherichia coli (1)
- Enterohaemorrhagic Escherichia coli (1)
- Entscheidbarkeit (1)
- Enzym (1)
- Epiphyten (1)
- Epipremnum aureum (1)
- Erdwärmepumpen (1)
- Etendeka (1)
- Europa (1)
- Europäische Aktiengesellschaft (1)
- Evolution (1)
- Exodermis (1)
- Expertensystem (1)
- FACS-Analyse (1)
- FACS-analysis (1)
- FTIR-Spektroskopie (1)
- FTIR-spectroscopy (1)
- Fas (1)
- Fibroblast (1)
- Finite Elemente Methode (1)
- Finite-Elemente-Methode (1)
- Flagelle (1)
- Flugsimulator (1)
- Fluoreszenzmikroskopie (1)
- Foamyvirus (1)
- Fortpflanzung (1)
- Fossil (1)
- Fossile Muscheln (1)
- Franconian line (1)
- Freilebende Amöben (1)
- Fränkische Linie (1)
- Fusion (1)
- GCHP (1)
- GFP (1)
- GFP-Reportergen (1)
- GFP-reportersystem (1)
- GIS (1)
- Gartenerde (1)
- Gaschromatographie-Massenspektrometrie (1)
- Gedächtnis (1)
- Gedächtniszellen (1)
- Gefäßpflanzen (1)
- Geißel <Biologie> (1)
- Gentrifizierung (1)
- Geo-Ecology (1)
- Geochemistry (1)
- Geochronologie (1)
- Geoinformationssystem (1)
- Geology (1)
- Geomorphogenese (1)
- Geomorphologie (1)
- Geomorphology (1)
- Geophysik (1)
- Geothermie (1)
- Geothermik (1)
- Geothermische Energie (1)
- Geothermobarometrie (1)
- Geoökologie (1)
- Germanistics (1)
- Germanistik (1)
- Geschichte 1780-2000 (1)
- Gesellschaftsrecht (1)
- Gesteinskunde (1)
- Glaciation (1)
- Glaziomarines Sediment (1)
- Gliom (1)
- Glioma (1)
- Glycerin (1)
- Granit (1)
- Gravimetrie (1)
- Gravimetrische Geodäsie (1)
- Ground water (1)
- Growth Arrest (1)
- Grundwasser (1)
- Grundwasserbildung (1)
- Grün fluoreszierendes Protein (1)
- HBMEC (1)
- HPH2 (1)
- HUVEC (1)
- Helianthus annuus (1)
- Henneberg <Grafschaft> (1)
- History (1)
- Homologieklonierung (1)
- Honigbiene (1)
- Hydraulische Leitfähigkeit (1)
- Hydrogeology (1)
- Hymenoptera (1)
- Hüllprotein (1)
- Hüllproteine (1)
- ICP-AES (1)
- Iberian Range (Spain) (1)
- Immature B cell (1)
- Immunmodulation (1)
- Impfung (1)
- In vivo (1)
- Incompatible parasite-host interaction (1)
- Indonylessigsäure <3-> (1)
- Inhibition (1)
- Inkompatible Parasit-Wirt-Interaktion (1)
- Insekt (1)
- Insekten (1)
- Interleukin 4 (1)
- Interleukin-4 (1)
- Isotope (1)
- JNK (1)
- JNK stress pathway (1)
- JNK-Streß-Kinase (1)
- Jahresbericht (1)
- Judentum (1)
- Jura (1)
- Jura <Geologie> (1)
- Jurassic (1)
- Kalahari (1)
- Kalahari <Nordwest> (1)
- Kaoko-Gürtel (1)
- Karbon (1)
- Karoo-Becken (1)
- Kation (1)
- Keimzentrumsreaktion (1)
- Keltiberischen Ketten (Spanien) (1)
- Keltiberisches Gebirge (1)
- Kernhülle (1)
- Kernlamina (1)
- Kieferorthopädische Drähte (1)
- Kinabalu National Park (1)
- Kinasen (1)
- Kinderklinik (1)
- Kirche (1)
- Klassifikation (1)
- Klimamorphologie (1)
- Klimavariation (1)
- Koexistenz (1)
- Korezeptor (1)
- Korrosion (1)
- Kosmetik (1)
- Kostimulation (1)
- Kostimulatorisches Molekül (1)
- Körpergrösse (1)
- Körpergröße (1)
- LPS (1)
- LaXp180 (1)
- Laden (1)
- Ladyzhenskaya Konstante (1)
- Ladyzhenskaya constant (1)
- Lamin C2 (1)
- Lamine (1)
- Landscape History (1)
- Landschaftsgeschichte (1)
- Leber (1)
- Legionella (1)
- Legionellen (1)
- Leptothorax (1)
- Lernen (1)
- Lernregeln (1)
- Lipid Mikrodomänen (1)
- Lohenstein, Daniel Casper von / Grossmüthiger Feldherr Arminius (1)
- Lycopersicon esculentum (1)
- Lötverfahren (1)
- MALT-Typ Lymphom (1)
- MALT-type lymphoma (1)
- MAP-Kinase (1)
- MAPK-Signalwege (1)
- MAPKAP kinase (1)
- MAPKAP-Kinase (1)
- MHC Kl. I (1)
- MHC Klasse I (1)
- MHC class I (1)
- MIP (1)
- MK2 (1)
- MLR (1)
- Macht (1)
- Malaysia (1)
- Marginalzone (1)
- Mariental <Namibia (1)
- Markierungsgen (1)
- Marklager (1)
- Masern (1)
- Masernvirus (1)
- Mcl-1 (1)
- Mehragentensystem (1)
- Meiningen (1)
- Meiose (1)
- Membran-Adressierungs-Signal (1)
- Membranbarriere (1)
- Mensch (1)
- Metamorphose <Geologie> (1)
- Metapelit (1)
- Metapelite (1)
- Mid-German Crystalline Rise (1)
- Migration Period (1)
- Mikrohabitat (1)
- Mikroklima (1)
- Milet (1)
- Minimalfläche (1)
- Mip (1)
- Mitteldarm (1)
- Mitteldeutsche Kristallinzone (1)
- Mittlere Krümmung (1)
- Modelling (1)
- Molecular biology (1)
- Monozyten (1)
- Morphogenese (1)
- Motoneuron (1)
- Multi-Adaptor-Protein (1)
- Multi-agent system (1)
- Multiagentensystem (1)
- Mutation (1)
- Myristylierung (1)
- Myrothamnus flabellifolia (1)
- NMR-Bildgebung (1)
- NMR-imaging (1)
- Nachweis (1)
- Nahrungsqualität (1)
- Namibia <Nordost> (1)
- Namibia <Nordwest> (1)
- Namibia <Süd> (1)
- Narrative Analyse (1)
- Nervenzelle (1)
- Nicotiana tabacum (1)
- Niere (1)
- NtAQP1 (1)
- Nutzung (1)
- Oberkarbon (1)
- Okadasäure (1)
- Ontogenie (1)
- Oozyte (1)
- Oozyten (1)
- Oranje (1)
- Orthogneis (1)
- P-T pseudosections (1)
- P-T-Pseudoschnitte (1)
- PH-Domäne (1)
- PH-domain (1)
- PPIasen (1)
- PPIases (1)
- Pachytänspermatozyten (1)
- Palaeoecology (1)
- Palökologie (1)
- Pan-African metamorphic evolution (1)
- Parental care (1)
- Pathohistologie (1)
- Pedogenese (1)
- Pedogenesis (1)
- Peptid (1)
- Peptide (1)
- Permian (1)
- Permokarbon (1)
- Peroxisom (1)
- Petrography (1)
- Pflanzen (1)
- Pflanzengröße (1)
- Phage (1)
- Phageninduktion (1)
- Photosynthese (1)
- Physiologie (1)
- Phänologie (1)
- Plasmalemma (1)
- Plasmamembran (1)
- Plasmazellen (1)
- Poly-(ADP-Ribose)Polymerase (1)
- Polycomb (1)
- Polymorphismus (1)
- Porin (1)
- Prehistory (1)
- Prognose (1)
- Prospektion (1)
- Protein-Serin-Threonin-Kinasen (1)
- Proteinstoffwechsel (1)
- Proto-Onkoprotein Cot (1)
- Pulvini (1)
- Pyrgauchenia (1)
- Pyrgauchenia tristaniopsis (1)
- Quecksilber (1)
- RAGE (1)
- REM (1)
- RIM101 (1)
- Racemase (1)
- Raf (1)
- Raf <Biochemie> (1)
- Raf-Kinase (1)
- Raf-Kinasen (1)
- Regelbasiertes System (1)
- Regenbaum (1)
- Region (1)
- Regulation (1)
- Reinigung (1)
- Relativnormale (1)
- Report (1)
- Reportergen (1)
- Reproduktiver Konflikt (1)
- Resistenz (1)
- Retroviren (1)
- Rezeptor-Tyrosin-Kinase (1)
- Rheumatoide Arthritis (1)
- Rift (1)
- Rift Evolution (1)
- Riftentwicklung (1)
- Rossameise (1)
- Ruhla Crystalline Complex (1)
- Ruhlaer Kristallin (1)
- Rule-based Systems (1)
- Rüsselreflex (1)
- S-Phase-Fraktion (1)
- S-phase fraction (1)
- SH-SY5Y (1)
- SH2-Domänen Bindungsstelle (1)
- SH2-domain binding site (1)
- SHRIMP (1)
- STAT6 (1)
- STEC (1)
- Samenpflanzen (1)
- Schildkäfer (1)
- Schlacke (1)
- Schmidt, Arno / Das steinerne Herz (1)
- Schwermineral (1)
- Sekretion (1)
- Sekundärmetabolit (1)
- Selenit (1)
- Selenoprotein (1)
- Semelparitie (1)
- Serumentzug (1)
- Sexualdimorphismus (1)
- Shiga-Toxin 2 (1)
- Signal Transduktion (1)
- Signalkaskaden (1)
- Signaltransduction (1)
- Signalübertragung (1)
- Simulation (1)
- Single zircon evaporation (1)
- Softwarebibliothek (1)
- Sonnenblume (1)
- South Africa (1)
- Spektraltheorie (1)
- Spermatozyt (1)
- Spumaviren (1)
- SsAQP1 (1)
- SsAQP2 (1)
- Stabilität (1)
- Stadtentwicklung (1)
- Stadtteilzentren (1)
- Stadtteilzentrum (1)
- Stadtviertel (1)
- Standardanwendungssoftware (1)
- Standortplanung (1)
- Staphylococcus (1)
- Staphylococcus epidermidis (1)
- Stat6 (1)
- Stathmin (1)
- Sternfreie Sprache (1)
- Stofftransport (1)
- Stoffwechsel (1)
- Stokes Gleichung (1)
- Stokes equation (1)
- Stokes-Gleichung (1)
- Strahlentherapie (1)
- Stratigraphie (1)
- Straubing-Th´erien-Hierarchie (1)
- Straßenverkehr (1)
- Stress (1)
- Stressreaktion (1)
- Stx2 (1)
- Stx2-Mutante (1)
- Stx2-mutant (1)
- Subtractive hybridisation (1)
- Subtraktive Hybridisierung (1)
- Symbionten (1)
- Synaptonemalkomplex (1)
- Synovialmembran (1)
- Synökologie (1)
- Säugerzellen (1)
- Säugetiere (1)
- Säugling (1)
- Süd> (1)
- Südafrika (1)
- Südostasien (1)
- T cell activation (1)
- T cell receptor (1)
- T cell receptor (TCR) (1)
- T lymphocytes (1)
- T-Lymphozyten (1)
- T-Lymphozyten-Rezeptor (1)
- T-Zell-Rezeptor (1)
- T-Zellaktivierung (1)
- T-Zellrezeptor (1)
- T-Zellrezeptor (TZR) (1)
- T-cell receptor (1)
- T/B-Zellinteraktion (1)
- T/B-cell-interaction (1)
- TH2-Typ Cytokine (1)
- TH2-type cytokine (1)
- TITL (1)
- Tabak (1)
- Taxonomie (1)
- Taxonomy (1)
- Tectonic (1)
- Tektonik (1)
- Tephrostratigraphie (1)
- Textsorte (1)
- Th1 (1)
- Th2 (1)
- Theoretical Computer Science (1)
- Theoretische Informatik (1)
- Thüringisches Staatsarchiv (1)
- Tillit (1)
- Tomate (1)
- Tonoplast (1)
- Tonstein (1)
- Torulopsis glabrata (1)
- Toxoplasma gondii (1)
- Toxoplasmase gondii (1)
- Transport (1)
- Trisomie (1)
- Turgordruck (1)
- UTES (1)
- Umweltfaktor (1)
- Unconformity (1)
- University Library (1)
- Universitätsbibliothek (1)
- Unreife B-Zelle (1)
- Unterfranken (1)
- Untergrundmodell (1)
- Urbar (1)
- Uzawa Verfahren (1)
- Uzawa iteration (1)
- VH-Mutationsanalysen (1)
- VH-mutations (1)
- Valonia utricularis (1)
- Ventricaria ventricosa (1)
- Verbotenes Muster (1)
- Verbotsmuster (1)
- Vereisung (1)
- Verkehrsforschung (1)
- Vibrio cholerae (1)
- Virulenzfaktor (1)
- Vitamin D3 (1)
- Volumen (1)
- Vor- und Frühgeschichte (1)
- Vulkanismus (1)
- Völkerwanderungszeit (1)
- WEHI 231 (1)
- Wachs (1)
- Wachstum (1)
- Wachstumsstopp (1)
- Wasserstoffionenkonzentration (1)
- Wassertransport in Pflanzen (1)
- Westafrika (1)
- Wettenburg (1)
- Windengewächse (1)
- Wirt (1)
- Wirtszelle (1)
- Wuerzburg (1)
- Wurzburg (1)
- Wurzelsystem (1)
- Wärmespeicherung (1)
- Xenopus laevis (1)
- Xylemdruck (1)
- Xylemdruckmeßsonde (1)
- ZAP-70 (1)
- Zahnspangenreiniger (1)
- Zelle (1)
- Zelltod (1)
- Zentrales Nervensystem (1)
- Zentralnamibia (1)
- Zusammensetzung (1)
- Zytokeratin (1)
- Zytotoxizität (1)
- actin cytoskeleton (1)
- adaptation market place (1)
- affine minimal surface (1)
- affine normal (1)
- alloreaction (1)
- alpha-Methylacyl-CoA (1)
- alternative strategies (1)
- aneuploidy (1)
- aneusomy (1)
- anisomycin (1)
- antigen (1)
- antioxidants (1)
- ants (1)
- aquaporins (1)
- artificial chromosomes (1)
- association (1)
- associative (1)
- assoziativ (1)
- autoantibody (1)
- auxin (1)
- bHLH transcription factor (1)
- bacteria (1)
- bcl-2 (1)
- bentonite (1)
- beta A4 (1)
- biofilmformation (1)
- blood-brain-barrier (1)
- body size (1)
- boost (1)
- breast carcinoma (1)
- bromoisoxazoline alkaloids (1)
- bromotyrosine alkaloids (1)
- cartilage oligomeric matrix protein (1)
- caspase (1)
- caspases (1)
- centroaffine normal (1)
- characterisation (1)
- classical conditioning (1)
- classification (1)
- coexistence (1)
- community (1)
- competition (1)
- consultation business (1)
- coreceptor (1)
- cosmetic (1)
- costimulation (1)
- costimulatory molecule (1)
- council of apostles (1)
- cytokeratin (1)
- cytotoxicity (1)
- decidability (1)
- democracy (1)
- detection (1)
- dielectrophoresis (1)
- dimerization (1)
- dimorphism (1)
- direct stimulation (1)
- direkte Stimulation (1)
- distribution of property of moveable things (1)
- dot-depth problem (1)
- ecophysiology (1)
- edition (1)
- electrical measurements (1)
- elektrische Messungen (1)
- endliche Automaten (1)
- endosymbionts (1)
- envelope protein (1)
- environments (1)
- enzymatic defense mechanism (1)
- enzymatische Abwehrreaktion (1)
- enzyme (1)
- epidermidis (1)
- epiphytes (1)
- euclidean normal (1)
- euklidische Normale (1)
- exodermis (1)
- expert system (1)
- finite automata (1)
- finite element method (1)
- flagella (1)
- flight simulator (1)
- flow cytometry (1)
- fluorescence in situ hybridization (1)
- fluorescence microscopy (1)
- fluoreszierende in situ Hybridisierung (1)
- foamy virus (1)
- forbidden patterns (1)
- free-living freshwater amoebae (1)
- freilebende Süßwasseramöben (1)
- fusion (1)
- gammadelta T Zelle (1)
- gammadelta T cel l (1)
- gaschromatography-mass spectrometry (1)
- gemischte Lymphozytenreaktion (1)
- gene expression (1)
- geology (1)
- geophysics (1)
- geothermal energy (1)
- geothermobarometry (1)
- germinal centre (1)
- glaciomarine (1)
- glaziomarin (1)
- glycerol (1)
- gravimetry (1)
- growth (1)
- habitats (1)
- heat storage (1)
- homology cloning (1)
- honeybee (1)
- human (1)
- human brain microvascular endothelial cells (1)
- humane mikrovaskuläre Hirnendothelzellen (1)
- hydraulic conductivity (1)
- hymenoptera (1)
- identification (1)
- immunomodulation (1)
- in vitro (1)
- in vivo Monitoring (1)
- in vivo monitoring (1)
- in-situ-Hybridisierung (1)
- in-situ-hybridization (1)
- inhibition (1)
- insect (1)
- insects (1)
- intracellular multiplication (1)
- intracellular signal transduction (1)
- intrazelluläre Signaltransduktion (1)
- intrazelluläre Vermehrung (1)
- isotopes (1)
- kidney (1)
- kinases (1)
- klassisches Konditionieren (1)
- künstliche Chromosomen (1)
- künstlicher Speichel (1)
- learning (1)
- learning rules (1)
- life-history (1)
- lipid microdomains (1)
- lokale Dosisaufsättigung (1)
- lysogen (1)
- mammalian cells (1)
- marginal zone (1)
- mean curvature (1)
- measles (1)
- meiosis (1)
- membrane barrier (1)
- memory (1)
- memory cells (1)
- mercury (1)
- metapelitic rocks (1)
- microclimate (1)
- microhabitat (1)
- minimal surface (1)
- modelling (1)
- molecular phylogeny (1)
- molekulare Phylogenie (1)
- monocyte (1)
- morphogenesis (1)
- motoneuron (1)
- multi-adaptor-protein (1)
- mutation (1)
- myristoylation (1)
- narrative exegesis (1)
- natural enemies (1)
- natürliche Feinde (1)
- nichteheliche Lebensgemeinschaft (1)
- nuclear DNA content (1)
- nuclear envelope (1)
- nuclear lamina (1)
- nukleare DNA-Inhalt (1)
- okadaic acid (1)
- oocyte (1)
- oocytes (1)
- operant conditioning (1)
- operantes Konditionieren (1)
- oxidative stress (1)
- oxidativer Stress (1)
- p53 (1)
- pH (1)
- pachytene spermatocytes (1)
- panafrikanische Metamorphoseentwicklung (1)
- parasite (1)
- pathohistology (1)
- peroxisome (1)
- phage (1)
- phage induction (1)
- phenology (1)
- photosynthesis (1)
- physiology (1)
- plant quality (1)
- plant size (1)
- plasma cells (1)
- plasmalemma (1)
- poly-(ADP-ribose)polymerase (1)
- polymorphism (1)
- positive thymic selection (1)
- positive thymische Selektion (1)
- power (1)
- primary cells (1)
- primäre Zellen (1)
- proboscis extension reflex (1)
- prognosis (1)
- proliferation (1)
- proto oncoprotein Cot (1)
- protoplast transformation (1)
- protoplasten (1)
- proximal tubule (1)
- proximaler Tubulus (1)
- pulvini (1)
- purification (1)
- rOCT1 (1)
- rOCT2 (1)
- radiotherapy (1)
- receptor tyrosin kinase (1)
- regular languages (1)
- regulation (1)
- reguläre Sprachen (1)
- relative normal (1)
- reporter gene (1)
- reproductive conflict (1)
- resistance to apoptosis (1)
- retro virus (1)
- retroviral gene transfer (1)
- retroviraler Gentransfer (1)
- rheumatoid arthritis (1)
- rheumatoiden Arthritis (1)
- rootsystem (1)
- sFas (1)
- secretion (1)
- selenite (1)
- selenoprotein (1)
- semelparity (1)
- serum deprivation (1)
- sexual dimorphism (1)
- shiga toxin 2 (1)
- signalling cascades (1)
- spectral theory (1)
- stomata (1)
- stress (1)
- symbionts (1)
- synaptonemal complex (1)
- t(11;18)(q21;q21) (1)
- tephrostratigraphy (1)
- terminal differentiation (1)
- terminale Differenzierung (1)
- text type (1)
- th1 (1)
- th2 (1)
- tonoplast (1)
- transformation (1)
- transport (1)
- treehoppers (1)
- trisomy (1)
- tropics (1)
- tuff (1)
- turgor pressure (1)
- urbar (1)
- vaccination (1)
- vakuoläre Perfusion (1)
- volcanism (1)
- volume (1)
- wasserhaushalt (1)
- water relation (1)
- water relations (1)
- water transport in plants (1)
- water transport root (1)
- wax (1)
- xylem pressure (1)
- xylem pressure probe (1)
- zentroaffine Normale (1)
- Ökophysiologie (1)
- Ökosystem (1)
Institute
- Theodor-Boveri-Institut für Biowissenschaften (24)
- Institut für Virologie und Immunbiologie (8)
- Julius-von-Sachs-Institut für Biowissenschaften (7)
- Institut für Geologie (6)
- Institut für Molekulare Infektionsbiologie (6)
- Pathologisches Institut (4)
- Institut für deutsche Philologie (3)
- Institut für Geographie (2)
- Institut für Informatik (2)
- Institut für Mathematik (2)
Tropical rain forests and coral reefs are usually regarded as the epitome of complexity and diversity. The mechanisms, however, that allow so many species to coexist continuously, still need to be unraveled. Earlier equilibrium models explain community organization with a strict niche separation and specialization of the single species, achieved mainly by interspecific competition and consecutive resource partitioning. Recent non-equilibrium or stochastic models see stochastic factors ("intermediate disturbances") as more important. Such systems are characterized by broad niche overlaps and an unpredictable species composition. Mechanisms of coexistence are most interesting where species interactions are strongest and species packing is highest. This is the case within a functional group or guild where species use similar resources. In this project a community of seven closely related leaf beetle species (Chrysomelidae: Cassidinae) was investigated which coexist on a common host plant system (fam. Convovulaceae) in a tropical moist savanna (Ivory Coast, Comoé-Nationalpark). A broad overlap in the seasonal phenology of the leaf beetle species stood in contrast to a distinct spatial niche differentiation. The beetle community could be separated in a savanna-group (host plant: Ipomoea) and in a river side group (host plant: Merremia). According to a correspondence analysis the five species at the river side, using a common host plant, Merremia hederacea, proved to be predictable in their species composition. They showed a small scale niche differentiation along the light gradient (microhabitats). Laboratory studies confirmed differences in the tolerance towards high temperatures (up to 50°C in the field). Physiological trade-offs between phenology, microclimate and food quality seem best to describe patterns of resource use of the beetle species. Further a phylogeny based on mt-DNA sequencing of the beetle community was compared to its ecological resource use and the evolution of host plant use was reconstructed
Auf der Suche nach physiologischen Substraten der MAPK-aktivierten Proteinkinasen (MAPKAP-Kinasen), 3pK und MAPKAP-K2 (MK2), wurden Mitglieder eines Säuger-Polycomb-Komplexes, HPH2 und das Protoonkoprotein Bmi1, als Interaktionspartner identifiziert. Proteine aus der Polycomb-Gruppe (PcG) sind dafür bekannt, multimere, Chromatin-assoziierte Proteinkomplexe zu bilden. Diese wirken als transkriptionelle Repressoren und spielen als solche eine wichtige Rolle sowohl in der Regulation von Entwicklungsprozessen als auch in der Kontrolle der zellulären Proliferation. HPH2 bindet im Hefe two-hybrid-System sowohl an 3pK als auch an MK2. Die Kinasen coimmunpräzipitieren auch mit den PcG-Proteinen. Weiterhin wurde festgestellt, daß nicht aktivierte und DNA-assoziierte 3pK, ähnlich wie Bmi1, in einem in vivo Repressionsassay als transkriptioneller Repressor wirkt. Dies unterstellt, daß 3pK, wie Bmi1, fähig sein muß, andere PcG-Proteine an das Zielgen zu rekrutieren, wo sich dann ein biologisch funktioneller Repressionskomplex rekonstituiert. Bmi1 ist ein Phosphoprotein und beide MAPKAP-Kinasen konnten in dieser Arbeit als in vitro Bmi1-Kinasen identifiziert werden. Da der Phosphorylierungsstatus von Bmi1 mit seiner Dissoziation und der anderer PcG-Proteine vom Chromatin korreliert, könnten die MAPKAP-Kinasen Regulatoren einer phosphorylierungs-abhängigen PcG-Komplex/Chromatin-Interaktion sein. 3pK und MK2 wurden hier als die ersten Kinasen identifiziert, die in Assoziation mit Proteinen von PcG-Komplexen vorliegen, was ein funktionelles Zusammenwirken von MAPK-Signaltransduktionsnetzwerk und der Regulation der PcG-Funktion nahe legt. Ein weiterer durch das two-hybrid-System und Coimmunpräzipitationsexperimente identifizierter Interaktionspartner beider hier analysierter MAPKAP-Kinasen ist der basische Helix-Loop-Helix- (bHLH) Transkriptionsfaktor E47. Dieses E2A-kodierte Protein bindet als Homo- bzw. Heterodimer mit gewebespezifischen bHLH-Proteinen an sogenannte E-Box-DNA-Motive und ist so in die Regulation gewebespezifischer Genexpression und Zelldifferenzierung involviert. In dieser Arbeit konnten 3pK und MK2 als in vitro Kinasen des in Zellen phosphoryliert vorliegenden Transkriptionsfaktors identifiziert werden. Weiterhin führte die transiente Expression jeder dieser Kinasen in einem Reportergenassay mit einem E-Box-Promotorkonstrukt zu einer Repression der transkriptionellen Aktivität von E47. Der bHLH-Transkriptionsfaktor E47 interagiert also mit beiden MAPKAP-Kinasen, 3pK und MK2, was die Kinasen als neu identifizierte Regulatoren der E47-abhängigen Genexpression präsentiert. Mit dieser Arbeit ist ein erster Aufschluß der physiologischen Aktivität der MAPKAP-Kinasen 3pK und MK2 als transkriptionelle Regulatoren gelungen.
Vibrio cholerae, der Erreger der Cholera, ist ein Gram-negatives, fakultativ pathogenes Bakterium. In dieser Arbeit konnte die V. cholerae Oberflächenstruktur identifiziert werden, an die der temperente V.cholerae-Phage K139 adsorbiert. Phagenbindungs-Studien mit gereinigtem Lipopolysaccharid (LPS) ergaben, daß das O-Antigen der Serogruppe O1 den Phagenrezeptor darstellt. Zusätzlich wurden phagenresistente Mutanten des transluzenten O1 El Tor Inaba Stammes P27459 nach Inkubation mit einem lytischen K139-Derivat isoliert. Analysen des LPS-Laufverhaltens in Polyacrylamid-Gelen (PAA) zeigten, daß viele der Spontanmutanten defekte LPS-Moleküle synthetisierten, die entweder im O-Antigen, im Kernoligosaccharid oder in beidem betroffen waren.Phagenresistente Mutanten mit offensichtlich unverändertem LPS bildeten entweder transluzente oder opake Kolonien. Weiterhin wurden ausgewählte spontan phagenresistente Stämme genetisch analysiert. O-Antigen Mutanten wurden in Southernblot-Analysen mit spezifischen, gegen das bereits gut charakterisierte O-Antigen-Biosynthese-Gencluster (rfb) gerichtete Sonden untersucht. Zwei der O-Antigen negativen Stämme waren durch Insertion des IS-Elementes IS1004 in das rfb-Gencluster entstanden. Spontan phagenresistente Mutanten mit verändertem Kernoligosaccharid ohne O-Antigen (R-LPS-Mutanten) sind wahrscheinlich im Kernoligosaccharid-Biosynthese-Gencluster (waa) mutiert, das in der V. cholerae Datenbank identifiziert wurde. waaF, das für die Heptosyl-II-Transferase kodiert, wurde durch genetische Manipulation inaktiviert und zeigte im PAA-Gel das gleiche Migrationsverhalten wie zwei spontan phagenresistente Mutanten. In den Spontanmutanten konnte jedoch im Gegensatz zu der konstruierten Mutante durch ein WaaF-exprimierendes Plasmid lediglich das Kernoligosaccharid, nicht aber das O-Antigen wiederhergestellt werden. Weitere genetische Analysen ergaben, daß eine der Spontanmutanten 546 bp deletiert hatte, die Teile von waaF und waaL betrafen, letzteres kodiert dabei vermutlich für die O-Antigen-Ligase. Spontanmutanten mit intaktem O-Antigen aber verändertem Kernoligosaccharid konnten als galU-Mutanten charakterisiert werden, die auch im Galaktosekatabolismus beeinträchtigt waren. Zusätzlich wurden zwei weitere gal-Gene, galE und galK, durch genetische Manipulation inaktiviert. Diese Mutanten konnten ebenfalls keine Galaktose mehr verstoffwechseln, synthetisierten aber ein intaktes LPS. In Gegenwart hoher Galaktosekonzentrationen wurde in galU- und galE- Mutanten aufgrund der Defekte im Gal-Stoffwechsel Lyse beobachtet. Zusätzlich wurde die Rolle von galU und galE in der Biofilmbildung untersucht. Da der transluzente Wildtyp (Wt) im Gegensatz zu Opakvarianten keinen Biofilm bilden konnte, wurden galE und galU auch in einer Opakvariante inaktiviert. galU- und galE-Mutationen erzeugten in der Opakvariante wieder eine transluzente Koloniemorphologie und einen biofilm-negativen Phänotyp an abiotischen Oberflächen. Diese Daten deuten an, daß die Synthese von UDP-Galaktose ausgehend von UDP-Glukose für die Synthese des Exopolysaccharides (VPS) notwendig ist. Virulenzstudien in neugeborenen Mäusen ergaben, daß O-Antigen negative Stämme sowie galU-Mutanten sehr viel schlechter und R-LPS-Mutanten nicht mehr im Dünndarm kolonisieren konnten. Da galE und galEK-Mutanten ebenso gut wie der Wt kolonisierten, konnte ausgeschlossen werden, daß toxische Galaktose-Effekte für den Kolonisierungsdefekt der galU-Mutante verantwortlich waren. Zusätzlich wurde die Überlebensfähigkeit der LPS-Mutanten in Gegenwart von verschiedenen Substanzen, die nachweislich im menschlichen Dünndarm vorkommen, unter „in vitro“ Bedingungen untersucht. R-LPS und galU-Mutanten waren im Vergleich mit dem Wt sensitiver gegenüber schwachen organischen Säuren, Defensinen, dem Komplementsystem und Gallensäuren. O-Antigen negative Stämme waren dagegen weiterhin resistent gegenüber Gallensäuren und schwachen organischen Säuren aber sensitiv gegen die Komponenten des angeborenen Immunsystems. Bisher wurde für keine der LPS-Mutanten eine größere Beeinträchtigung weiterer Virulenzfaktoren, wie z.B. Motilität, Synthese der Pili TCP oder Choleratoxin-Produktion festgestellt. Auch die Zusammensetzung der Proteine in der äußeren Membran war offensichtlich nicht beeinträchtigt, allerdings wurde beobachtet, daß aus galU Mutanten in geringem Maße und aus R-LPS Mutanten in verstärktem Maße periplasmatische Proteine in den Überstand diffundieren können. Diese Ergebnisse deuten an, daß nicht nur das O-Antigen, wie bereits bekannt, sondern auch eine spezifische Kernoligosaccharid-Struktur für eine effektive Kolonisierung von V. cholerae essentiell ist. Der Grund dafür ist höchstwahrscheinlich in der Ausbildung einer stabilen äußeren Membran zu suchen, die die Persistenz in Gegenwart bakteriozider Substanzen des Dünndarms ermöglicht.
Der MHC der Lewis.1F-Ratte (RT1f) stimuliert die präferentielle Expansion von CD8-T-Zellen, die das V-Segment 8.2 (AV8S2) der TCR-alpha-Kette verwenden. Sowohl als Folge der positiven thymischen Selektion in der Lewis.1F-Ratte (LEW.1F) wie auch bei der RT1f-Alloerkennung. Es war Ziel dieser Arbeit, das MHC Kl. I-Molekül der LEW.1F-Ratte, das diese präferentielle Expansion von AV8S2-Zellen induziert, zu klonieren sowie die Kontaktpunkte der Interaktion zwischen dem MHC-Molekül und AV8S2 zu kartieren. Über RT-PCR wurde ein MHC-I-Gen der LEW.1F-Ratte (RT1.Af) isoliert, sequenziert und zusammen mit einem anderen MHC-I-Gen aus der LEW.1F-Ratte (A2f) analysiert, das von einer Arbeitsgruppe aus Babraham (Cambridge, UK) gefunden worden war. Durch einen Nukleotidsequenz-Vergleich von Af und A2f mit bekannten Ratte-MHC-I-Genen konnte gezeigt werden, daß die Sequenzen beider charakteristisch für Ratte-MHC-I-Gene sind. Beide Moleküle wurden stabil in L-Zellen, rCD80-transfizierte P815-Zellen und T-Zellhybridomen (THO35/1) exprimiert. Die serologische Charakterisierung mit 19 RT1f-reaktiven Alloantikörpern ergab, daß sich die LEW.1F-Serologie alleine durch Af erklären läßt. In einem Zytotoxizitätstest mit LEW.1F-reaktiven zytotoxischen T-Lymphozyten, wurde Af spezifisch erkannt, A2f dagegen nicht. Serologie und Zytotoxizitätstest zeigen, daß die RT1f-spezifische Alloerkennung das Af-Molekül fokussiert, A2f unbedeutend scheint. Möglicherweise, da dieses Molekül in der LEW.1F-Ratte nur schwach exprimiert ist. Die Interaktion von Af und A2f mit AV8S2-Zellen wurde mittels einer MLR (gemischte Lymphozytenreaktion) in der Alloerkennung untersucht: Af, nicht aber A2f, stimuliert die präferentielle Expansion AV8S2-positiver CD8-T-Zellen in der Alloreaktion. Somit ist Af als das Molekül identifiziert, daß die Überselektion von AV8S2-Zellen vermutlich auch in der thymischen Repertoire-Selektion induziert. Zur Kartierung der Af/AV8S2-Interaktion wurden Hybridmoleküle aus Aa und Af gentechnisch hergestellt: Aa und Af unterscheiden sich extrazellulär nur in sieben Aminosäuren, die konzentriert auf zwei Regionen des MHC-Moleküls liegen: "Region I" (AS 62, 63, 65, 69, 70) und "Region II" (167, 169). Aa stimuliert keine präferentielle AV8S2-Zell-Expansion, daher muß die charakteristische Kombination dieser sieben Aminosäuren für die präferentielle Interaktion mit AV8S2-positiven CD8-T-Zellen ausschlaggebend sein. Durch MLRs mit Hybrid-exprimierenden Stimulatorzellen wurde gezeigt, daß beide Regionen zur präferentiellen Expansion AV8S2-exprimierender CD8-T-Zellen beitragen. Durch den Vergleich mit anderen Daten unseres Labors konnte dargelegt werden, daß die beta-Kette zur präferentiellen Interaktion von AV8S2-Zellen mit Af keinen spezifischen Beitrag leistet. Ebenso unbeteiligt ist die Komplementarität-bestimmende Region 2 (CDR2) der alpha-Kette. Die charakteristischen Sequenzen von CDR1alpha und CDR3alpha dagegen sind für die präferentielle Expansion von AV8S2-positiven CD8-T-Zellen durch Af essentiell.
Mitogene Signale werden von der Plasmamembran zum Zellkern über komplexe z.T. miteinander verknüpfte Signaltransduktionskaskaden übertragen. In der vorliegenden Arbeit wurde das Proto-Onkoprotein Cot als eine neue Komponente von mitogenen Signalkaskaden identifiziert, die die Fähigkeit hat, sowohl die klassische mitogene Kaskade als auch den JNK-Streß-Kinaseweg zu aktivieren. Wildtyp und aktiviertes Cot phosphorylieren und aktivieren MEK-1 und SEK-1 in vitro. Expression von onkogenem Cot in 293-, NIH3T3- und PC12- Zellen führt auch in vivo zu einer Phosphorylierung der endogenen Proteine c-Jun und ERK-1/2. In Bezug auf diese Fähigkeit, zwei unterschiedliche Signalkaskaden zu stimulieren, wurden die biologischen Effekte von Cot auf verschiedene Zelltypen, sowie seine tumorauslösende Wirkung in der Maus untersucht. Expression von onkogenem c-Raf-1 oder v-Mos führt zu einer Differenzierung in PC12-Zellen. Cot induziert ebenfalls Neuritenbildung in diesen Zellen. Ähnlich wie v-raf hat onkogenes cot eine antiapoptotische Wirkung auf 32D-Zellen nach IL-3-Entzug. In neugeborenen NSF/N-Mäusen induzierte retroviral-exprimiertes onkogenes Cot nach einer Latenzzeit von 7-10 Wochen B-Zell-Lymphome vergleichbar mit v-raf/v-myc induzierten Tumoren [191]. Diese Daten stimmen mit der Rolle von Cot in der klassischen mitogenen Kaskade überein und lassen darauf schließen, daß die simultane Aktivierung von JNK in diesem Zusammenhang keinen antagonistischen Effekt hat. Aktives NF-kB reguliert die Transkription einer Reihe von Ziel-Genen, die in verschiedenen zellulären Funktionen involviert sind. Viele Stimuli, Mitglieder der mitogenen Kaskade eingeschlossen, aktivieren NF-kB, so z.B. auch c-Raf-1, das mit Cot überlappende Effekte auf Apoptose-Suppression, Transformation und Differenzierung aufweist und auf der gleichen Ebene zu funktionieren scheint. In der vorliegenden Arbeit wurde gezeigt, daß Cot NF-kB aktiviert, dieses aber indirekt durch einen autokrinen Loop geschieht, der den EGFR und die Streß-Kinasekaskade involviert. Mit c-Raf-1 konnten in unserem Labor bereits ähnliche Ergebnisse gezeigt werden [234]. Eine direkte Interaktion zwischen Cot und der NF-kB-Aktivierung konnte durch die Identifikation von p105, einem Vorläuferprotein und Regulator von NF-kB, als Cot-Interaktionspartner in einem Two-Hybrid Screen gefunden werden. Die Tatsache, daß Cot mit IKKa und IkBa, beides NF-kB-Regulatoren, copräzipitiert, deutet ebenfalls auf einen direkten Mechanismus der Cot-abhängigen NF-kB-Aktivierung hin. Dieser Prozeß wird hauptsächlich durch den Transport der Komponenten des NF-kB-Transkriptionsfaktorkomplexes und seiner Regulatoren zwischen Zytosol und Nukleus kontrolliert. Das kleine G-Protein Ran spielt eine kritische Rolle in derartigen Transportprozessen und wurde interessanterweise ebenfalls in einem Two-Hybrid Screen als neuer Interaktionspartner von Cot identifiziert. Durch Coimmunopräzipitationsexperimente konnte dieses Ergebnis bestätigt werden. Diese Daten weisen auf einen neuen Mechanismus der NF-kB-Regulation durch Cot hin und geben neue Ansätze, die komplexen Funktionen von Cot in der Zelle zu diskutieren und weiter zu analysieren.
Metabolische Veränderungen und Zelltod in neuralen Zellen durch "Advanced Glycation Endproducts"
(2000)
Advanced Glycation Endproducts (AGEs) entstehen aus nicht-enzymatisch glykierten Proteinen. In einer Folge von Dehydratations-, Kondensations- und Oxidationsschritten entsteht ein heterogenes Gemisch aus farbigen, fluoreszierenden Verbindungen. AGE-modifizierte Proteine sind unlöslich und proteaseresistent, bei ihrer Bildung entstehen freie Radikale und andere reaktive Intermediate. Von der AGE-Bildung betroffen sind vor allem langlebige Proteine mit geringem Umsatz wie Kollagen und Kristallin aber auch pathologische Proteinablagerungen, z.B. in der Alzheimer´schen Demenz (AD). Die Akkumulation von AGEs spielt in der Pathogenese von Komplikationen des Diabetes und der Hämodialyse eine Rolle, für die AD wird eine Beteiligung von AGEs am Krankheitsverlauf diskutiert. Die Alzheimer´sche Demenz ist gekennzeichnet durch den histologischen Nachweis seniler Plaques und neurofibrillärer Bündel in Hirngewebe der Patienten. Auf Ebene des Stoffwechsels kommt es zu einer Verringerung des zerebralen Glukoseumsatzes, es finden sich Marker sowohl für eine Akutphasenreaktion als auch für oxidativen Stress. In dieser Arbeit wurde gezeigt, dass die AGE-Bildung in vitro die Aggregation von ßA4, dem Hauptbestandteil der senilen Plaques in der AD, beschleunigt. Der geschwindigkeits-bestimmende Schritt ist dabei die Glykierung des ßA4-Monomers. Durch Zugabe von Übergangsmetall-ionen kann die Vernetzung weiter beschleunigt werden. Dies deutet darauf hin, dass AGEs zur Plaquebildung in der AD beitragen, redox-aktive Eisenionen sind in der AD mit den Plaques assoziiert. Mit Hilfe von Metallchelatoren, Antioxidantien oder mit Substanzen, welche die zur Vernetzung notwendigen Aminogruppen abblocken, lässt sich die Aggregation von ßA4 verlangsamen oder verhindern. AGEs wirken zytotoxisch auf BHK 21 Fibroblasten und humane SH-SY5Y Neuroblastoma Zellen. Die Toxizität unterschiedlicher Modell-AGEs ist abhängig von verschiedenen Faktoren, u.a. von dem zur Herstellung verwendeten Protein und vom Zucker. Die LD50 der Modell-AGEs korreliert mit dem AGE-Gehalt und der Radikalproduktion der Präparationen in vitro. Die AGE-Toxizität ist hauptsächlich radikalvermittelt. Oxidativer Stress lässt sich in AGE-behandelten Zellen durch die Bildung intrazellulärer Lipidperoxidationsprodukte nachweisen. Auf Ebene der Signaltransduktion konnte die Aktivierung des Transkriptions-faktors NfkB als Zeichen der Stressabwehr nachgewiesen werden. Die Gabe von Antioxidantien vor oder gleichzeitig mit den AGEs verringerte den Zelltod. Auch durch das Blockieren des Rezeptors für AGEs (RAGE) mit spezifischen Antikörpern konnte die Zahl überlebender Zellen gesteigert werden. Durch AGEs ausgelöster Stress führt in Neuroblastoma Zellen bereits in Konzentrationen unterhalb der LD50 zu Störungen im Redoxstatus, es kommt zur Depletion von GSH und zu Verschiebungen im Verhältnis GSH/GSSG. Damit einher gehen Veränderungen im Energiestoffwechsel der Zelle, nach anfänglich erhöhter Glukoseaufnahme kommt es im weiteren Verlauf der Inkubation zu einer Verringerung der Aufnahme von Glukose aus dem Medium, gefolgt von einer Zunahme der Laktatausschüttung. Ausserdem wurde eine Depletion von ATP um bis zu 50 Prozent nachgewiesen. Antioxidantien können die Störungen im Metabolismus der Zellen verhindern oder abschwächen, die meisten der getesteten Substanzen konnten Redoxstatus und ATP-Gehalt der Zellen zu normalisieren. Obwohl sich in AGE-gestressten Zellkulturen durch Annexin-Fluorescein-Markierung ein geringfügig erhöhter Prozentsatz apoptotischer Zellen nachweisen ließ und AGEs auch die Freisetzung von Cytochrom c ins Zytoplasma induzieren, verläuft der durch AGEs ausgelöste Zelltod verläuft offenbar insgesamt nekrotisch. Sowohl durch Radikalproduktion als auch über rezeptorvermittelte Signalwege verursachen AGEs oxidativen Stress und induzieren Veränderungen im Metabolismus der Zelle. Dies führt u. a. dazu, dass für die antioxidativen Schutzmechanismen der Zelle nicht mehr genügend Energie zur Verfügung steht. AGE-Stress trägt damit in einer selbstverstärkenden Reaktionskaskade zur Neurodegeneration bei und kann so an der Pathogenese der AD beteiligt sein. Antioxidantien und auch AGE-Inhibitoren könnten einen interessanten Ansatz zur Entwicklung alternativer Therapien in der AD darstellen.
Stimulation von unreifen B-Lymphozyten der Maus über den Antigenrezeptor führt zu Wachstumsstopp und Apoptose. Eine gleichzeitige Stimulation über CD40 bewirkt die Aufrechterhaltung der Proliferation und schützt die Zellen vor programmiertem Zelltod. In der vorliegenden Arbeit konnte gezeigt werden, dass Stimulation über CD40 die Genexpression von A1 - einem antiapoptotischen Mitglied der Bcl2-Proteinfamilie - in primären B-Lymphozyten aus Mäusen anregt. Die CD40 Abhängigkeit der A1 Expression wurde in WEHI 231 Lymphomzellen, einem Modellsystem für unreife B-Lymphozyten, bestätigt. Um das Potential von A1 in den BZR-abhängigen Prozessen Wachstumsstopp und Apoptose zu untersuchen, wurden WEHI 231 Zellen mit A1 transduziert. Die cDNA von A1 wurde mittels rekombinanten, replikationsdefekten Retroviren eingeschleust. Positive Populationen wurden über chimäre Marker aus Gelbfluoreszenzprotein und Zeocin Resistenzprotein, deren Expression über eine "internal ribosomal entry site" (IRES) an die Expression des Testgens gekoppelt war, selektioniert. Nach Stimulation der A1 transduzierten Zellen über den BZR wiesen diese eine größere Überlebensrate auf als Zellen der entsprechenden Kontrollpopulation. Dabei hatte die konstitutive Expression von A1 jedoch keinerlei Einfluß auf den durch BZR Stimulation hervorgerufenen Zellzyklusarrest. Dieses Ergebnis erklärt sich durch die Tatsache, dass A1 alleine nicht in der Lage war, die durch den BZR negativ regulierte Expression von c-myc RNA zu verhindern. Auch der BZR-abhängige Aktivitätsverlust eines NFkB-abhängigen Luciferasereporters wurde durch A1 alleine nicht verhindert. Die Überexpression von induzierbarem cMyc-ER in A1 transduzierten Zellen, um damit durch parallele Induktion des ektopischen cMyc-ER den BZR-induzierten Verlust von cMyc auszugleichen, führte nicht zur Wiederherstellung der Proliferationsfähigkeit dieser Populationen. Ektopisches cMyc-ER hatte im Gegenteil selbst eine proliferationshemmende und apoptotische Wirkung, die von A1 unbeeinflusst blieb. Untersuchungen zur Funktionsweise von A1 zeigten, dass es den Abbau des Caspasesubstrates Poly-ADP-Ribose-Polymerase (PARP), die Aktivierung der Caspase 7, aber auch die Freisetzung radikalischer Sauerstoffverbindungen aus den Mitochondrien unterdrückte. Das CD40-Signal scheint sich also oberhalb von A1 in zwei Hauptkomponenten aufzuteilen, wovon eine die Proliferationsfähigkeit aufrecht erhält, während die andere das Überleben der Zellen sichert. A1 ist allem Anschein nach für letztere von zentraler Bedeutung.
Das fakultativ intrazelluläre Bakterium Legionella pneumophila wurde erstmals 1977 als Erreger der Legionellose, einer schweren atypisch verlaufenden Pneumonie identifiziert. Es besitzt ein duales Wirtssystem und kann sich sowohl in aquatischen Habitaten in Protozoen als auch in phagozytierenden Humanzellen als Pathogen vermehren. Zur Analyse der komplexen Interaktion zwischen Pathogen und Wirtszelle wurde in dieser Arbeit ein GFP (Green Fluorescent Protein)-Reportersystem etabliert und erfolgreich eingesetzt. Es erlaubt ein in vivo Monitoring von Legionella Infektionen und ermöglicht die schnelle Quantifizierung bakterieller Invasion in Wirtszellen in Abhängigkeit von verschiedenen Faktoren. Zur Etablierung der GFP-vermittelten Fluoreszenz wurde eine transkriptionelle Fusion des gfpmut2-Gens mit dem Legionella spezifischen mip ("macrophage infectivity potentiator")-Promoter (Pmip) konstruiert. Zusätzlich wurde ein Vektor mit dem von Listeria stammenden sod ("super oxid dismutase")-Promoter eingesetzt. Mit diesen Vektoren transformierte Legionella-Stämme zeigten nach entsprechender Anregung eine starke Grünfluoreszenz und belegen somit erstmals die Funktionalität von GFP in Legionella. Durch den Einsatz von Fluoreszenzmikroskopie, Spektrofluorimetrie und Durchflusszytometrie (FACS-Analyse) wurden die Stämme hinsichtlich der Unterschiede in der Virulenz und der intrazellulären Vermehrung untersucht. Ergebnisse, die durch die zeitaufwendige Bestimmung von CFU-Werten ermittelt wurden, konnten verifiziert und damit die Validität des GFP-Reportersystems in Legionella bestätigt werden. Quantitative Analysen der mip-Promoteraktivität belegen die konstitutive Expression und zeigen, dass Unterschiede in der Virulenz nicht auf variierende mip-Promoteraktivität zurückzuführen sind. Darüber hinaus konnte der Einfluss verschiedener Phagozytose-Inhibitoren auf die Aufnahme von Legionellen in die Protozoenwirte Acanthamoeba castellanii und Hartmannella vermiformis mittels des GFP-Reportersystems quantifiziert und qualitativ bewertet werden. Durch die Verwendung des Inhibitors Cytochalasin D konnte ein Einfluss Mikrofilament-abhängiger Phagozytose auf die Aufnahme in H. vermiformis und A. castellanii ausgeschlossen werden. Wie in Inhibitionsstudien mit Cycloheximid und Methylamin bestätigt werden konnte, erfolgt die Phagozytose in H. vermiformis wahrscheinlich vorwiegend über Rezeptor-vermittelte-Endozytose. Dem Protozoenwirt A. castellanii stehen dagegen zusätzliche Möglichkeiten der bakteriellen Internalisierung zur Verfügung. Diese Ergebnisse bestätigen die postulierte Heterogenität der Aufnahme-Mechanismen innerhalb verschiedener Protozoenwirte. Nach erfolgter Phagozytose von L. pneumophila wird der endosomale Weg der Phagolysosom- Reifung blockiert, hierfür wird die Sekretion bislang unbekannter Effektoren verantwortlich gemacht. Durch die Konstruktion von C-terminalen Mip::GFP-Fusionsproteinen sollte die Detektion einer eventuellen Translokation des Mip-Proteins als Virulenzfaktor innerhalb der Wirtszelle ermöglicht werden. Die erzeugten Fusionsproteine waren wahrscheinlich aufgrund der homodimeren Mip-Struktur instabil und wurden nicht über die Cytoplasmamembran hinweg transportiert. Sie erwiesen sich daher als nicht geeignet, dieser Fragestellung weiter nachzugehen. Da die in vivo Funktion von PPIasen (Peptidyl-Prolyl-cis/trans-Isomerasen) wie dem Mip-Protein in Prokaryoten bis heute weitgehend unbekannt ist, sollte im zweiten Teil dieser Arbeit versucht werden, einen Interaktionspartner zu identifizieren und den Einfluss der Dimerisierung und der PPIase-Aktivität des Mip-Proteins auf die Virulenz von L. pneumophila zu untersuchen. Durch Quervernetzung-Experimente konnte ein putativer, prokaryotischer Interaktionspartner des Legionella Mip-Proteins detektiert werden. Die N-terminale Aminosäure-Sequenzierung ergab jedoch keinerlei Homologie zu bereits bekannten Legionella- oder anderen Proteinen. Es kann nicht ausgeschlossen werden, dass eine N-terminale Blockierung die Aufklärung der Sequenz ursächlich verhindert. Wie in früheren Arbeiten gezeigt wurde, ist die PPIase-Aktivität des Legionella Mip-Proteins für die Invasion und das intrazelluläre Überleben in Protozoen, Monozyten und der Makrophagen-ähnlichen Zelllinie U937 nicht notwendig. Ein weiteres Charakteristikum des Proteins ist seine homodimere Struktur und die Assoziation mit der äußeren Membran. In Kooperation mit der Arbeitsgruppe von Prof. Dr. G. Fischer in Halle konnte durch Deletion der N-terminalen Domäne (AS 4-79) ein verkürztes Dimer-defizientes Legionella Mip-Protein (L.p.FKBP-20-3, 80-213) erzeugt und biochemisch charakterisiert werden. Durch site-spezifische Mutagenese N-terminal lokalisierter Aminosäuren (K11A/D32A, Y16A/D32A und M38,42E) konnte deren Beteiligung an der Dimerisierung nachgewiesen werden. Zur Analyse des Einflusses der dimeren Ouartärstruktur auf die Pathogenität wurde ein mip-negativer Stamm mit dem nur noch als Monomer vorliegenden Mip-Protein (L.p.FKBP-20-3, 80-213) in cis komplementiert und die Expression sowie Integration in L. pneumophila PhilI JR32-2.4 verifiziert. Ergebnisse aus Infektionsstudien zeigten deutlich, dass die Dimerisierung des Legionella Mip-Proteins und nicht die Isomerase-Aktivität für die Infektion von monozellulären Systemen entscheidend ist. Im Gegensatz dazu konnte in Tierexprimenten (Meerschweinchen) die Beteiligung der Isomerase-Aktivität an der Pathogenität von L. pneumophila nachgewiesen werden. Der Verlust der Isomerase-Aktivität wirkt sich, verglichen mit dem monozellulären System (A. castellanii), im Tiermodel wesentlich dramatischer auf das intrazelluläre Überleben aus. Mit site-spezifisch verändertem Mip-Protein komplementierte Legionella-Stämme zeigten eine intrazelluläre Vermehrung in Abhängigkeit der gemessenen in vitro Isomerase-Restaktivität. Durch den Einsatz der dimerisierungsdefizienten Mip-Komplementante, L. pneumophila PhilI JR32-2.4, wurde die Notwendigkeit der Dimerisierung des Mip-Proteins auch im Tiermodell bestätigt. Durch die vorliegende Arbeit konnte gezeigt werden, dass die Funktion der Isomerase-Aktivität für die Infektion monozellulärer Systeme und höherer Organismen unterschiedlich ist.
B-Zell-Lymphome des mukosaassoziierten lymphatischen Gewebes (MALT) entwickeln sich außerhalb des primären lymphatischen Gewebes und entstehen hauptsächlich im Magen aufgrund einer H. pylori-assoziierten chronischen Entzündung. Vorangegangene immunhisto-chemische und funktionelle Untersuchungen zeigten, daß die Tumorzellen phänotypisch Gedächtnis-B-Zellen entsprechen und Antigenrezeptoren auf ihrer Zelloberfläche exprimieren. In der vorliegenden Arbeit konnten mit Hilfe von molekulargenetischen Antigenrezeptor-analysen die Tumorzellpopulationen identifiziert und charakterisiert werden. Dabei wurde deutlich, daß sowohl mono- als auch biklonale B-Zell-Lymphome existieren. Im Vergleich zu neueren veröffentlichten Daten von MALT-Typ Lymphomen aus der Speicheldrüse, konnte jedoch bei den hier untersuchten gastralen Tumoren keine VH-Gen-restriktion nachgewiesen werden. Die tumorspezifischen VH-Mutationsanalysen zeigten, daß es sich bei den Tumor-B-Zellen auch genotypisch um Gedächtnis-B-Zellen handelt, die jedoch offensichtlich unter-schiedlich lange dem Mechanismus der Keimzentrumsmaturation ausgesetzt worden waren. Zudem konnte bei mono- und biklonale Lymphomen, im Gegensatz zu Fällen mit poly-klonalem Entzündungsinfiltrat die Translokation t(11;18)(q21;q21) nachgewiesen werden. Ausgehend von der Tatsache, daß die Tumorprogression dieser B-Zell-Lymphome anfangs noch abhängig von dem lokal vorhandenen Mikromilieu zu sein scheint, wurden die tumorinfiltrierenden T-Zellen (TITL) genauer charakterisiert. Es wurden überwiegend CD4+ TITLs nachgewiesen, die sowohl aktiviert (C69+) als auch immunkompetent (CD28+) waren und die für T/B-Zell-Kooperationen essentiellen Moleküle wie CD40-Ligand und Fas-Ligand exprimierten. Zudem konnten im Tumorgewebe vor allem TH2/3-Typ Cytokine (IL10, IL13, TGFb1) nachgewiesen werden, die ebenfalls das Tumorwachstum in vitro positiv beeinflussen können. Um in Zukunft spezifischere Untersuchungen zu den Wechselwirkungen zwischen Tumor-B-Zellen und TITLs durchführen zu können, wurde abschließend ein Zellkultursystem ent-wickelt, mit dessen Hilfe es möglich sein wird das Tumormikromilieu in vitro spezifisch zu simulieren, um so das Verhalten der Tumor-B-Zellen auch ex vivo beobachten und analysieren zu können. Die Daten dieser Arbeit geben einen vertieften und verbesserten Einblick in die tumorspezifischen Mechanismen und ermöglichen den Entwurf eines neuen detaillierteren Mo-dells zur Tumorentstehung und -progression von niedrig-maligne MALT-Typ Lymphomen.
Nach Aktivierung differenzieren B-Zellen entweder direkt zu IgM sezernierenden Plasmazellen oder treten in den Differenzierungsweg zur Gedächtniszelle ein, der sowohl durch die Affinitätsreifung als auch den Klassensprung zu sekundären Immunglobulin-Isotypen gekennzeichnet ist. Welchen Weg die B-Zelle durchläuft, ist abhängig von der Intensität und der Dauer des BZR-Signals, von der Verfügbarkeit und der Art der T-Zell-Hilfe und von weiteren Signalen in der speziellen Mikroumgebung des Keimzentrums. Der Transkriptionsfaktor Blimp-1 ("B lymphocyte induced maturation protein 1") wird als ein „Mastergen“ der terminalen B-Zell-Differenzierung betrachtet und ist in der Lage, die komplexen Differenzierungsprozesse zu Ig-sezernierenden Plasmazellen auszulösen und voranzutreiben. Die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit identifizieren Blimp-1 als wichtigen Regulator, der bestimmt, ob eine B-Zelle zur Plasmazelle oder zur Gedächtniszelle differenziert. Unter Verwendung ruhender, primärer B-Zellen der Maus, die in vitro mit Interleukin-4 (IL-4), anti-mF(ab´)2 oder anti-CD40 in verschiedenen Kombinationen sowohl in An- als auch in Abwesenheit von LPS stimuliert wurden, konnte in der vorliegenden Arbeit gezeigt werden, dass die IgM-Sekretion und die Expression von Blimp-1 durch Signalgebung über den BZR oder CD40 und durch IL-4 entweder nicht induziert oder sogar unterdrückt wird. Die Zugabe von IL-2 und IL-5 induziert die Expression von Blimp-1 und erleichtert die Sekretion von IgM und IgG1 in diesem System. Gleiches kann durch direkte Transduktion der B-Zellen mit rekombinanten Retroviren erreicht werden, die für Blimp-1 codieren. Auf der anderen Seite wird der durch IL-4 induzierte Klassensprung nach IgG1 durch Blimp-1 gehemmt. Blimp-1 bewirkt daher ein Umschalten des B-Zell-Differenzierungsweges von der Gedächtniszelle zur Plasmazelle. Die Unterdrückung der Expression von Blimp-1 sowohl durch Antigen-BZR-Wechselwirkungen als auch durch die von T-Helferzellen abhängige Signalgebung über CD40 und IL-4 unterdrückt die terminale Differenzierung zur Plasmazelle und ist für den Eintritt und das Durchlaufen des Gedächtniszell-Differenzierungsweges notwendig. Zur Identifikation von Genen, deren Expression durch Blimp-1 direkt oder indirekt beeinflusst wird, wurde Blimp-1 in WEHI 231 B-Lymphomzellen unter Verwendung rekombinanter Retroviren überexprimiert. Messika et al. zeigten, dass die Überexpression von Blimp-1 in B-Lymphomzellen in Abhängigkeit vom Reifungsstadium der Zelle entweder einen Wachstumsnachteil, gefolgt vom Zelltod, induziert oder zur terminalen Differenzierung führt. Obwohl WEHI 231 Zellen unreife, d.h. sIgM+ B-Zellen repräsentieren, exprimieren Blimp-1 transduzierte WEHI 231 Zellen die J-Kette, zeigen eine erhöhte Konzentration der für die sekretorische Form der my-Kette codierenden mRNA, exprimieren den Plasmazellmarker Syndecan-1 auf ihrer Oberfläche und sezernieren für kurze Zeit IgM. Diese Differenzierungsprozesse gehen allerdings mit einem Wachstumsnachteil und Zellzyklus-Arrest, gefolgt vom Zelltod, einher. Blimp-1 exprimierende WEHI 231 Zellen zeigen somit den Phänotyp kurzlebiger Plasmazellen. Eine Langzeitkultur Blimp-1+ WEHI 231 Zellen führt zum Verlust des differenzierten Phänotyps, d.h der Erhalt IgM-sezernierender WEHI 231 Zellen ist nicht ohne weitere Maßnahmen möglich. Auf molekularer Ebene hemmt Blimp-1 die Expression von c-myc und diejenige des antiapoptotischen Bcl-2 Familienmitgliedes A1, stimuliert aber die Expression von mad4. Die Verschiebung des Verhältnisses von Myc/Max- zu Mad/Max-Heterodimeren zugunsten von Mad/Max-Komplexen und die daraus resultierende Inhibition der Transkription von Myc-abhängigen, proiliferationsfördernden Genen ist in vielen Systemen als von zentraler Bedeutung für die Initiation von Differenzierungsprozessen beschrieben und wurde auch bereits für B-Zellen diskutiert. Auch in primären B-Zellen führt Blimp-1 zu einer verstärkten Expression von mad4. Wird der durch Blimp-1 bewirkte Verlust der Expression von A1 durch dessen Überexpression in Blimp-1+ WEHI 231 Zellen kompensiert, so überleben diese Zellen wieder erheblich länger, bleiben aber weiterhin im Zellzyklus arretiert. Der differenzierte Phänotyp, charakterisiert durch die verstärkte Expression von mad4 und der Sekretion von IgM, wird dabei aufrechterhalten. Wachstumsnachteil und Zelltod können in diesem System daher entkoppelt werden. In primären Zellen führt Blimp-1 ebenfalls zur Erniedrigung der A1 Expression. Da diese Zellen aber nicht in dem Maße wie WEHI 231 Zellen absterben, kann der Verlust von A1 offensichtlich besser kompensiert werden. Die Lebensdauer einer Blimp-1+ Plasmazelle ist somit durch Manipulation der Expression von antiapoptotischen Molekülen wie A1 verlängerbar.