Inaktivierung von HDGF in HT29-Zellen durch siRNA
Gene silencing of HDGF in HT29-cells by means of RNA interference
Zitieren Sie bitte immer diese URN: urn:nbn:de:bvb:20-opus-52356
- Im Rahmen dieser Arbeit wurde die Expression des putativen Onkogens HDGF (Hepatoma Derived Growth Factor) in der humanen Kolonkarzinomzelllinie HT29 mittels RNA Interferenz herunterreguliert. Zwei unterschiedliche, für das Zielgen HDGF spezifische siRNAs wurden hierzu jeweils in einen Plasmidvektor kloniert. Zellen der Kolonkarzinomzelllinie HT29 wurden zunächst transient und stabil mit den beiden resultierenden Plasmidvektoren transfiziert, die Expression von HDGF in den transfizierten Zellen mittels Realtime-PCR quantifiziert und mit derIm Rahmen dieser Arbeit wurde die Expression des putativen Onkogens HDGF (Hepatoma Derived Growth Factor) in der humanen Kolonkarzinomzelllinie HT29 mittels RNA Interferenz herunterreguliert. Zwei unterschiedliche, für das Zielgen HDGF spezifische siRNAs wurden hierzu jeweils in einen Plasmidvektor kloniert. Zellen der Kolonkarzinomzelllinie HT29 wurden zunächst transient und stabil mit den beiden resultierenden Plasmidvektoren transfiziert, die Expression von HDGF in den transfizierten Zellen mittels Realtime-PCR quantifiziert und mit der Expression in mit Lipofektamin behandelten Kontrollzellen verglichen. Durch die stabile Transfektion beider Plasmidvektoren konnte die HDGF-Expression fast komplett supprimiert werden. Im Rahmen eines cDNA-Array konnten außer einer Expressionsverminderung von HDGF noch multiple Expressionsveränderungen anderer Gene identifiziert werden. Dies ist zum einen durch unspezifische, durch den Plasmidvektor bedingte Effekte erklärbar. Zum anderen aber ist die Deregulation vieler dieser Gene ein Effekt der Inaktivierung von HDGF.…
- In this thesis the expression of the putative oncogene HDGF (Hepatoma Derived Growth Factor) in a colorectal cancer cell-line was down-regulated by means of RNA interference. The expression of HDGF was almost completely suppressed. The expression of various other genes was also influenced. This is on the one hand due to unspecific effects caused by the plasmidvector. On the other hand it is also an effect of the gene silencing of HDGF.
Autor(en): | Anika Grell |
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URN: | urn:nbn:de:bvb:20-opus-52356 |
Dokumentart: | Dissertation |
Titelverleihende Fakultät: | Universität Würzburg, Medizinische Fakultät |
Institute der Universität: | Medizinische Fakultät / Medizinische Klinik und Poliklinik II |
Datum der Abschlussprüfung: | 11.11.2010 |
Sprache der Veröffentlichung: | Deutsch |
Erscheinungsjahr: | 2010 |
Allgemeine fachliche Zuordnung (DDC-Klassifikation): | 6 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / 61 Medizin und Gesundheit / 610 Medizin und Gesundheit |
Normierte Schlagworte (GND): | Hepatoma Derived Growth Factor; HDGF; Kolorektales Karzinom; RNA Interferenz; Kolonkarzinom |
Freie Schlagwort(e): | Colorectal Cancer; HDGF; Hepatoma Derived Growth Factor; RNA interference |
Datum der Freischaltung: | 06.12.2010 |
Betreuer: | Priv.-Doz. Ralph Melcher |
Lizenz (Deutsch): | Deutsches Urheberrecht |