Heidi Kränzle

• Mit Hilfe der Einzelzell PCR wurden CD 19+ B-Zellen aus dem peripheren Blut von zwei Patienten mit systemischen Lupus erythematodes isoliert und anschließend die Kappa-Leichtketten Rearrangements analysiert. Es konnten 194 nichtproduktiv und 221 produktiv rearrangierte Immunblobuline sequenziert werden und mit alterstypischen Repertoires verglichen werden. Dazu zählten die B-Zellen aus dem Nabelschnurblut, verschiedene B-Zellen der kindlichen Tonsille und B-Zellen aus dem Erwachsenenblut. Die Schwerpunkt der Analyse lagen dabei auf dem AufbauMit Hilfe der Einzelzell PCR wurden CD 19+ B-Zellen aus dem peripheren Blut von zwei Patienten mit systemischen Lupus erythematodes isoliert und anschließend die Kappa-Leichtketten Rearrangements analysiert. Es konnten 194 nichtproduktiv und 221 produktiv rearrangierte Immunblobuline sequenziert werden und mit alterstypischen Repertoires verglichen werden. Dazu zählten die B-Zellen aus dem Nabelschnurblut, verschiedene B-Zellen der kindlichen Tonsille und B-Zellen aus dem Erwachsenenblut. Die Schwerpunkt der Analyse lagen dabei auf dem Aufbau des Kappa-Repertoire aus den einzelnen V-Kappa-Familien, auf der Modifikation der VkJk-Schnittstelle durch die verschiedenen Rekombiantionsenzyme (TdT, Exonukleasen, durch P- und N-Nukleotide sowie auf der Modifikation der Immunglobuline durch somatische Hypermutation.…
• The human kappa chain repertoire form genomic VkJk rearrangements of individual peripheral CD19+ B cells of two patients with systemic lupus erythematosus were analysed by single cell PCR technique. 221 productive and 194 nonproduktive VkJk rearrangements were sequenced and compared to human cord blood VkJk repertoire, to different B cells from child tonsil and to adult peripheral B cell VkJk repertoire. The analysis includes the distribution of individual V-genes, the sequence diversity in the CDR3 provided by exonuclease activity,The human kappa chain repertoire form genomic VkJk rearrangements of individual peripheral CD19+ B cells of two patients with systemic lupus erythematosus were analysed by single cell PCR technique. 221 productive and 194 nonproduktive VkJk rearrangements were sequenced and compared to human cord blood VkJk repertoire, to different B cells from child tonsil and to adult peripheral B cell VkJk repertoire. The analysis includes the distribution of individual V-genes, the sequence diversity in the CDR3 provided by exonuclease activity, TdT-activitiy, p-nucleotide formation and the influence by somatic hypermutation.…