Refine
Has Fulltext
- yes (15)
Is part of the Bibliography
- yes (15)
Year of publication
- 2012 (15) (remove)
Document Type
- Journal article (8)
- Doctoral Thesis (7)
Keywords
- Medizin (2)
- adalimumab (2)
- antirheumatic agents (2)
- regression analysis (2)
- treatment outcome (2)
- /immunofluorescence (1)
- 2,5-diketopiperazines (1)
- Adoptiver T Zell Transfer (1)
- Alcoholic and Non-Alcoholic Steatohepatitis (1)
- Alkoholische Fettlebererkrankung (1)
- Apoptosis (1)
- B cell (1)
- C57BL/KALWRIJ mouse (1)
- CD4(+) T-cells (1)
- Chimärische Rezeptoren (1)
- Cytoplasma (1)
- Dihydroorotat-Dehydrogenase (1)
- Durchflusszytometrie (1)
- Escherichia Coli (1)
- European experience (1)
- Fettleber (1)
- Geschlechtsunterschied (1)
- Graft-versus-Host-Disease (1)
- HIV (1)
- Hepatitis B (1)
- Hepatitis C (1)
- Hepatitis C infection (1)
- Homing-Rezeptor (1)
- IL28B (1)
- Immunfluoreszenz (1)
- Kernpore (1)
- Kerntransport (1)
- Kostimulation (1)
- LL-37 (1)
- Leberzirrhose (1)
- Multiples Myelom (1)
- Myc (1)
- NADPH oxidase (1)
- Nichtalkoholische Fettlebererkrankung (1)
- Nucleoporine (1)
- Nup214 (1)
- Oberflächenmarker (1)
- P67(PHOX) (1)
- Plasmozytom (1)
- Pyrimidin-Synthese (1)
- Pyrimidine Synthesis (1)
- RNS-Bindungsproteine (1)
- SVR (1)
- Scleroderma (1)
- Signaltransduktion (1)
- T Zellen (1)
- T cell (1)
- T cells (1)
- T-Lymphozyt (1)
- TCTP (1)
- TDM (1)
- Transkription (1)
- Uridin (1)
- Uridine (1)
- YB-1 (1)
- acute myeloid leukaemia (1)
- adoptive t cell transfer (1)
- akute myeloische Leukämie (1)
- anti-proliferative effects (1)
- antimikrobielle Peptide (1)
- arthritis (1)
- bone disease (1)
- chemistry (1)
- chimeric antigen receptors (1)
- contrast-enhanced ultrasound. (1)
- costimulation (1)
- derivates (1)
- differentiation (1)
- diketopiperazines (1)
- e. coli Nissle (1)
- fibrosis progression (1)
- gene (1)
- graftversushostdisease (1)
- host genetics (1)
- idiotype (1)
- infection (1)
- interferon gamma (1)
- intramolecular Michael addition (1)
- mRNA translation (1)
- mRNA-Translation (1)
- mono specific antibody (1)
- mono spezifischer Antikörper (1)
- multicomponent Ugi-type reaction (1)
- multiple myeloma (1)
- mutation (1)
- nuclear pore complex (1)
- nucleocytoplasmatic transport (1)
- nucleoporine (1)
- plasma cells (1)
- prophylaxis (1)
- region (1)
- renal perfusion (1)
- resistance (1)
- rheumatoid (1)
- rheumatoid arthritis (1)
- scid mice (1)
- signalling (1)
- strategy (1)
- transcription (1)
- tumor specific antigen (1)
Institute
- Medizinische Klinik und Poliklinik II (15) (remove)
Two brothers in their fifties presented with a medical history of suspected fungal allergy, allergic bronchopulmonary aspergillosis, alveolitis, and invasive aspergillosis and pulmonary fistula, respectively. Eventually, after a delay of 50 years, chronic granulomatous disease (CGD) was diagnosed in the index patient. We found a new splice mutation in the NCF2 (p67-phox) gene, c.1000+2T -> G, that led to several splice products one of which lacked exons 11 and 12. This deletion was in frame and allowed for remarkable residual NADPH oxidase activity as determined by transduction experiments using a retroviral vector. We conclude that p67-phox which lacks the 34 amino acids encoded by the two exons can still exert considerable functional activity. This activity can partially explain the long-term survival of the patients without adequate diagnosis and treatment, but could not prevent progressing lung damage.
Multiple myeloma (MM) is a lethal human cancer characterized by a clonal expansion of malignant plasma cells in bone marrow. Mouse models of human MM are technically challenging and do not always recapitulate human disease. Therefore, new mouse models for MM are needed. Mineral-oil induced plasmacytomas (MOPC) develop in the peritoneal cavity of oil-injected BALB/c mice. However, MOPC typically grow extramedullary and are considered poor models of human MM. Here we describe an in vivo-selected MOPC315 variant, called MOPC315.BM, which can be maintained in vitro. When injected i.v. into BALB/c mice, MOPC315.BM cells exhibit tropism for bone marrow. As few as 10\(^4\) MOPC315.BM cells injected i.v. induced paraplegia, a sign of spinal cord compression, in all mice within 3-4 weeks. MOPC315.BM cells were stably transfected with either firefly luciferase (MOPC315.BM.Luc) or DsRed (MOPC315.BM.DsRed) for studies using noninvasive imaging. MOPC315.BM.Luc cells were detected in the tibiofemoral region already 1 hour after i.v. injection. Bone foci developed progressively, and as of day 5, MM cells were detected in multiple sites in the axial skeleton. Additionally, the spleen (a hematopoietic organ in the mouse) was invariably affected. Luminescent signals correlated with serum myeloma protein concentration, allowing for easy tracking of tumor load with noninvasive imaging. Affected mice developed osteolytic lesions. The MOPC315.BM model employs a common strain of immunocompetent mice (BALB/c) and replicates many characteristics of human MM. The model should be suitable for studies of bone marrow tropism, development of osteolytic lesions, drug testing, and immunotherapy in MM.
The well-known Ugi reaction of aldehydes with amines, carboxylic acids and isocyanides leads to the formation of acyclic alpha-acylaminocarboxamides. Replacement of the carboxylic acid derivatives with beta-acyl substituted acrylic acids gives access to highly substituted 2,5-diketopiperazines in one single reaction-step without additives or complex reaction procedures. The obtained diketopiperazines show anti-proliferative effects on activated T cells and represent therefore potential candidates for targeting unwanted T cell-mediated immune responses.
The objective of this study was to use data from a noninterventional study to evaluate the effectiveness of adalimumab in rheumatoid arthritis (RA) patients during routine clinical practice and to explore the potential impact of patient and disease characteristics in response to adalimumab therapy. A total of 2,625 RA patients with specified data at baseline (prior to initiating adalimumab treatment) and 12 months entered this study between April 2003 and March 2009. We evaluated response to adalimumab therapy and conducted stepwise regression and subgroup analyses of factors influencing therapeutic response. During the 1-year adalimumab treatment period, disease activity decreased from a baseline mean disease activity score-28 joints (DAS28) of 5.9–3.9, while functional capacity improved from 59.0 to 68.4 Funktionsfragebogen Hannover (FFbH) percentage points. In multivariate regression models, high baseline DAS28 was the strongest positive predictor for decrease in disease activity, and high baseline functional capacity was associated with reduced gains in functional capacity. Male gender was a positive predictor of therapeutic response for both disease activity and functional capacity, while older age and multiple previous biologics were associated with a reduced therapeutic response. Subset analyses provided further support for the impact of baseline DAS28, FFbH, and prior biologic therapy on therapeutic response during treatment. We conclude that treatment with adalimumab leads to decreased disease activity and improved function during routine clinical practice. Patients with high disease activity and low functional capacity are particularly benefitted by adalimumab therapy.
The objective of this study was to use data from a noninterventional study to evaluate the effectiveness of adalimumab in rheumatoid arthritis (RA) patients during routine clinical practice and to explore the potential impact of patient and disease characteristics in response to adalimumab therapy. A total of 2,625 RA patients with specified data at baseline (prior to initiating adalimumab treatment) and 12 months entered this study between April 2003 and March 2009. We evaluated response to adalimumab therapy and conducted stepwise regression and subgroup analyses of factors influencing therapeutic response. During the 1-year adalimumab treatment period, disease activity decreased from a baseline mean disease activity score-28 joints (DAS28) of 5.9–3.9, while functional capacity improved from 59.0 to 68.4 Funktionsfragebogen Hannover (FFbH) percentage points. In multivariate regression models, high baseline DAS28 was the strongest positive predictor for decrease in disease activity, and high baseline functional capacity was associated with reduced gains in functional capacity. Male gender was a positive predictor of therapeutic response for both disease activity and functional capacity, while older age and multiple previous biologics were associated with a reduced therapeutic response. Subset analyses provided further support for the impact of baseline DAS28, FFbH, and prior biologic therapy on therapeutic response during treatment. We conclude that treatment with adalimumab leads to decreased disease activity and improved function during routine clinical practice. Patients with high disease activity and low functional capacity are particularly benefitted by adalimumab therapy.
Direct-acting antiviral drugs (DAAs) are currently replacing antiviral therapy for Hepatitis C infection. Treatment related side effects are even worse and the emergence of resistant viruses must be avoided because of the direct-antiviral action. Altogether it remains a challenge to take treatment decisions in a clinical setting with cost restrictions. Genetic host factors are hereby essential to implement an individualized treatment concept. In recent years results on different genetic variants have been published with a strong association with therapy response, fibrosis and treatment-related side effects. Polymorphisms of the IL28B gene were identified as accurate predictors for therapy response and spontaneous clearance of HCV infection and are already used for diagnostic decisions. For RBV-induced side effects, such as hemolytic anemia, associations to genetic variants of inosine triphosphatase (ITPA) were described and different SLC28 transporters for RBV-uptake have been successfully analyzed. Fibrosis progression has been associated with variants of Vitamin D receptor (VDR) and ABCB11 (bile salt export pump). Cirrhotic patients especially have a high treatment risk and low therapy response, so that personalized antiviral treatment is mandatory. This review focuses on different host genetic variants in the pathogenesis of Hepatitis C at the beginning of a new area of treatment.
Antimikrobielle Peptide und Proteine spielen eine wichtige Rolle bei der angeborenen Immunabwehr. Sie sind auf verschiedenen Schleimhautoberflächen des Körpers zu finden, zum Beispiel auch in der Schleimschicht des Gastrointestinaltraktes. Beim Menschen sind drei Familien antimikrobiell wirksamer Peptide bekannt: die Defensine, die Cathelicidine und die Histatine. LL-37 ist das einzige Cathelicidin, das bisher beim Menschen gefunden wurde. Das Ziel der vorliegenden Arbeit war, den Effekt des probiotischen Bakteriums E. coli Nissle auf die LL-37-Genexpression in Kolonepithelzellen zu analysieren. Zunächst wurde hierfür die bakterizide Wirksamkeit von synthetischem LL-37 auf E. coli Nissle in vitro nachgewiesen. Anschließend wurde die antimikrobielle Aktivität verschiedener Kolonepithelzelllinien gegenüber E. coli Nissle untersucht und die LL-37-Genexpression in den Zelllinien bestimmt. Zwei der vier untersuchten Zelllinien (SW 620 und Geki-2) zeigten eine signifikante antimikrobielle Aktivität gegenüber E. coli Nissle. Die LL-37-Genexpression wurde in den Zelllinien T84 und Geki-2 gesteigert. Aus diesen Ergebnissen kann man folgern, dass die antimikrobielle Aktivität der Zelllinie Geki-2 auf eine erhöhte LL-37-Expression zurückzuführen ist, während die antimikrobielle Aktivität der Zelllinie SW 620 unabhängig von der LL-37-Expression ist. Die probiotische Wirksamkeit des Bakteriums E. coli Nissle könnte somit unter anderem durch eine Induktion der LL-37-Genexpression in differenzierten Kolonepithelzellen erklärt werden.
Dieses Projekt soll zur Entwicklung eines Bluttests beitragen, um bei allogen stammzelltransplantierten (allo-SZT) Patienten eine drohende akute Graft-versus-Host
Disease (aGVHD) vorhersagen und von einer Infektionskomplikation unterscheiden zu
können. Die aGVHD und opportunistische Infektionen, wie etwa eine Zytomegalievirus-
Infektion, stellen die Hauptrisiken der allo-SZT dar. Eine durch einen prädiktiven Test verbesserte Vorhersage bzw. Differenzierung dieser beiden schweren omplikationen
könnte zu einem breiteren Einsatz der allo-SZT führen.
Eine Reihe von Erkenntnissen lassen die Vermutung zu, dass bestimmte Homing-
Rezeptoren auf T-Zellen im peripheren Blut als Marker zur Vorhersage und Differenzierung zwischen einer aGVHD und Infektionskomplikationen dienen könnten. So wurde in Mausmodellen gezeigt, dass die Pathogenese der aGVHD ein streng zeitlich regulierter und organspezifischer Immunprozess ist. Alloreaktive T-Zellen müssen bestimmte Homing-Rezeptoren exprimieren, um in die Zielorgane der aGVHD (Gastrointestinaltrakt, Leber und Haut) einwandern zu können. Die Immunreaktion auf eine Infektion setzt ebenfalls voraus, dass in der adaptiven Immunantwort T-Zellen organ- und entzündungsspezifische Homing-Rezeptoren exprimieren.
Eine zentrale Voraussetzung für einen prospektiven klinischen Test mit allo-SZT Patienten ist die Kenntnis der physiologischen Bandbreite der Oberflächenmarker auf
T-Lymphozyten in Gesunden, um diese von pathophysiologischen Veränderungen unterscheiden zu können. Ziel dieser Arbeit war es daher, eine effiziente und zuverlässige Methode zu entwickeln, um das Homing-Rezeptor-Profil von humanen T-Zellen im peripheren Blut analysieren zu können. Dazu wurde ein urchflusszytometrie-Test mit 25 Oberflächenmarkern etabliert, die eine Rolle in der Pathogenese der aGVHD und bei Infektionen spielen könnten. Mit diesem Test wurde die Expression der
Oberflächenmarker von 21 gesunden Probanden an 8 Zeitpunkten über einen Zeitraum von 3 Wochen analysiert.
Die untersuchten Oberflächenmarker lassen sich dabei entsprechend ihrer Expressionsmuster in drei Kategorien einteilen, nämlich (I) zeitlich stabile niedrige,
(II) zeitlich stabile hohe und (III) dynamisch schwankende Expression. Aufbauend auf diesen Ergebnissen für gesunde Probanden wurde am Universitätsklinikum Würzburg eine prospektive klinische Studie an aGVHD-Patienten begonnen.
Durch die im Labor der AG Topp standardisierte Verfahren konnten im Rahmen dieser Arbeit stabile T Zell Linien aus primär humanen CMV spezifischen T Zellen und CMV spezifischen T Zellen mit chimärischen Rezeptoren hergestellt werden. Die Anzahl der chimärischen Rezeptoren auf den unterschiedlichen T Zellinien ist nicht signifikant unterschiedlich und beträgt ca. 17000 Rezeptoren pro Zelle. Bei der Überprüfung des Lyseverhaltens CMV spezifischer T Zellen gegenüber CMV spezifischer T Zellen transduziert mit einem chimärischen Rezeptor zeigt sich das gleiche Lyseverhalten. Um die zeitliche Dynamik dieses Verhaltens besser darzustellen, wurde ein FACS basierter Lysierungsversuch selbstständig entwickelt und etabliert. Somit konnte herausgestellt werden, dass das Lyseverhalten der T Zelllinien sowohl der CMV spezifischen T Zellen als auch das der Erst- und Zweitgeneration- T Zelllinien CAR CD19z und CAR CD19/28z vergleichbar war. Alle genannten Zelllinien lysieren ihre Targetzellen sowohl in der Quantität als auch in der zeitlichen Dynamik vergleichbar. Dies ist die einzige Gemeinsamkeit der verglichenen T Zell Aktivierungssysteme. In allen anderen funktionellen Versuchen ist die Aktivierung der T Zellen über einen chimärischen Rezeptor dem der physiologischen Aktivierung über den T Zell Rezeptor unterlegen. Der Proliferationsversuch mit CFSE zeigt eindeutig, dass nur die T Zellen, die über den TCR aktiviert werden, das Potential haben, sich zu teilen. Die T Zellen, die über den CAR sowohl der ersten als auch der zweiten Generation aktiviert werden, teilen sich nicht. Der Defekt der CAR T Zellen zeigt sich auch in der Hochregulation von CD25, einem Aktivierungsmarker für T Zellen. Die T Zellen, die durch die chimärischen Rezeptoren sowohl der ersten als auch der zweiten Generation aktiviert werden, regulieren CD25 nicht so stark nach oben wie die T Zellen, die physiologisch durch den TCR aktiviert werden. Diese Minderaktivierung spiegelt sich auch in der Zytokinproduktion wieder. Auch hier zeigt sich die unvollständige Aktivierung der CAR T Zellen. In der intrazellulären Zytokinmessung sieht man, dass bei CAR T Zellen der ersten und zweiten Generation zum einen die Einzelzellen weniger IFNy produzieren, zum anderen die Gesamtzahl der Zellen, die Zytokine produzieren, weniger ist als im Vergleich zur TCR Aktivierung. Dieses Phänomen der defizienten Aktivierung und der funktionellen Defekte von CAR T Zellen ist bekannt. Dies konnte noch einmal unter standardisierten und kontrollierten Bedingungen bestätigt werden. Durch die relativ neue Methode der durchflusszytometrischen Bead Technologie konnte dies nun zum ersten Mal realisiert werden. Es zeigte sich, dass ein signifikanter Unterschied zwischen den verschiedenen Aktivierungsmodi der T Zellen besteht. Eine physiologische Aktivierung von T Zellen führt zu einer höheren Maximum-Phosphorylierung als eine Aktivierung über den Erstgeneration CAR. Der signifikante Unterschied zeigt sich bei den MAP Kinasen ERK, JNK und p38. Somit ist dies ein Hinweis, dass die Signaltransduktion auf breiter Ebene aufgrund des alleinigen Vorhandenseins der Zeta Kette bei den CAR CD19z T Zellen, defizient ist und nicht ausreicht für eine volle Aktivierung, die eine volle Funktionalität der T Zelle nach sich ziehen würde. Diese unzureichende Aktivierung soll durch die kostimulatorische Komponente CD28 beim Zweitgenerationrezeptor CAR CD19/28z aufgehoben werden. In der Proliferation, Zytokineproduktion und den Aktivierungsmarkern zeigt sich keine Verbesserung im Vergleich zum Erstgenerationrezeptor bei CMV spezifischen T Zellen. Dieses Ergebnis wird bestätigt und korreliert damit, dass es keinen Unterschied in der maximalen Phosphorylierung von ERK, JNK und p38 zwischen Erstgeneration CAR CD19z und Zweitgeneration CAR CD19/28z gibt. Somit ist dieses System geeignet, um aus dem Phosphorylierungsstatus von MAP Kinasen von CAR T Zellen auf die Funktionalität dieser T Zellen zu schließen.
Background: Multiple myeloma (MM) is a B-cell malignancy, where malignant plasma cells clonally expand in the bone marrow of older people, causing significant morbidity and mortality. Typical clinical symptoms include increased serum calcium levels, renal insufficiency, anemia, and bone lesions. With standard therapies, MM remains incurable; therefore, the development of new drugs or immune cell-based therapies is desirable. To advance the goal of finding a more effective treatment for MM, we aimed to develop a reliable preclinical MM mouse model applying sensitive and reproducible methods for monitoring of tumor growth and metastasis in response to therapy. Material and Methods: A mouse model was created by intravenously injecting bone marrow-homing mouse myeloma cells (MOPC-315.BM) that expressed luciferase into BALB/c wild type mice. The luciferase in the myeloma cells allowed in vivo tracking before and after melphalan treatment with bioluminescence imaging (BLI). Homing of MOPC-315.BM luciferase+ myeloma cells to specific tissues was examined by flow cytometry. Idiotype-specific myeloma protein serum levels were measured by ELISA. In vivo measurements were validated with histopathology. Results: Strong bone marrow tropism and subsequent dissemination of MOPC-315.BM luciferase+ cells in vivo closely mimicked the human disease. In vivo BLI and later histopathological analysis revealed that 12 days of melphalan treatment slowed tumor progression and reduced MM dissemination compared to untreated controls. MOPC-315.BM luciferase+ cells expressed CXCR4 and high levels of CD44 and a4b1 in vitro which could explain the strong bone marrow tropism. The results showed that MOPC-315.BM cells dynamically regulated homing receptor expression and depended on interactions with surrounding cells. Conclusions: This study described a novel MM mouse model that facilitated convenient, reliable, and sensitive tracking of myeloma cells with whole body BLI in living animals. This model is highly suitable for monitoring the effects of different treatment regimens.