Lehrstuhl für Biochemie
Refine
Has Fulltext
- yes (121)
Is part of the Bibliography
- yes (121)
Year of publication
Document Type
- Doctoral Thesis (61)
- Journal article (57)
- Preprint (2)
- Book article / Book chapter (1)
Keywords
- Vaccinia-Virus (11)
- Maus (8)
- Replikation (8)
- cancer (8)
- oncolytic virotherapy (6)
- Proteine (5)
- SMN (5)
- identification (5)
- oncolytic virus (5)
- vaccinia virus (5)
- Cancer (4)
- DNA-Replikation (4)
- Small nuclear RNP (4)
- Vaccinia virus (4)
- gene expression (4)
- replication (4)
- Biogenese (3)
- Inhibitor (3)
- Onkolyse (3)
- RNS-Spleißen (3)
- Regulation (3)
- Replikationsursprung (3)
- Signaltransduktion (3)
- Transkriptionsfaktor (3)
- Translation <Genetik> (3)
- Tumor (3)
- angiogenesis (3)
- biochemistry (3)
- breast-tumors (3)
- metastasis (3)
- oncolysis (3)
- therapy (3)
- virotherapy (3)
- ALS (2)
- Biochemie (2)
- Biotransformation (2)
- Breast-tumors (2)
- CIP2A (2)
- DNA replication (2)
- DNS-Reparatur (2)
- Endoribonuklease P (2)
- Expression (2)
- Genexpression (2)
- Herpesvirus (2)
- Immunotherapy (2)
- Immunsuppression (2)
- In-vivo (2)
- Initiation (2)
- Interaktion (2)
- LARP4B (2)
- Lung cancer (2)
- Lungenkrebs (2)
- Messenger-RNS (2)
- NO (2)
- Nude-mice (2)
- ORC (2)
- PRMT5 (2)
- Prostatakrebs (2)
- RNase P (2)
- Saccharomyces cerevisiae (2)
- Schizophrenie (2)
- Schizosaccharomyces pombe (2)
- Spleißosom (2)
- Therapy (2)
- Transcription (2)
- USP28 (2)
- VACV (2)
- Virotherapy (2)
- Zebrabärbling (2)
- Zebrafisch (2)
- Zelldifferenzierung (2)
- adenovirus (2)
- biotransformation (2)
- blood (2)
- breast cancer (2)
- cancer treatment (2)
- cell cycle (2)
- electron microscopy (2)
- elongation (2)
- fusion and fission (2)
- in vitro (2)
- infection (2)
- inflammation (2)
- innate immunity (2)
- latency (2)
- lymph nodes (2)
- malignant melanoma (2)
- miR-30 (2)
- miRNA processing (2)
- microarray (2)
- microenvironment (2)
- mitochondria (2)
- mouse models (2)
- nude-mice (2)
- oncolytic viruses (2)
- onkolytische Virotherapie (2)
- p97 (2)
- protein (2)
- präreplikativer Komplex (2)
- reporter gene (2)
- schizophrenia (2)
- translation (2)
- tumors (2)
- type I interferon (2)
- vaccinia (2)
- virus reactivation (2)
- zebrafish (2)
- 26S proteasome (1)
- 7SK RNA (1)
- AD5 mutation (1)
- ADSC (1)
- ATG proteins (1)
- ATG12-ATG5 conjugate (1)
- ATP-Abhängigkeit (1)
- ATP-dependent (1)
- Activation (1)
- AdMSC (1)
- Agent (1)
- Aktin Zytoskelett (1)
- Allergie (1)
- Allergy (1)
- Allgemeine Entzündungsreaktion (1)
- Arabidopsis (1)
- Assembly (1)
- BRET (1)
- BRM (1)
- BV-2 (1)
- Biene (1)
- Bierhefe (1)
- Biolumineszenz-Resonanzenergie-Transfer (1)
- Biomarker (1)
- Biopolymere (1)
- Bisphenol A (1)
- Blood-brain barrier (1)
- Bose–Einstein condensates (1)
- Brahma (1)
- Breast-cancer (1)
- Bäckerhefe (1)
- C-MYC (1)
- CCR4 (1)
- CD9 (1)
- CDT1 (1)
- CGG repeat (1)
- CLIP-seq (1)
- COX-2 (1)
- CPG Island (1)
- CXorf44 (1)
- Catalyst (1)
- Ccr4-Not (1)
- Cdc48 (1)
- Cdc6 (1)
- Cell cycle (1)
- Cervix carcinoma (1)
- Cervix-Karzinom (1)
- Chaperone (1)
- Chemische Biologie (1)
- Chemotherapie (1)
- Chemotherapy (1)
- Chinese family (1)
- Chromatin-remodeling complexes (1)
- Cofaktor (1)
- Combination therapy (1)
- Cortical Actin Cytoskeleton (1)
- Costimulation (1)
- Cyclo-GMP (1)
- Cyclophosphamide (1)
- DHX30 (1)
- DNA Sekundärstruktur (1)
- DNA damage repair (1)
- DNA helicase (1)
- DNA secondary structure (1)
- DNA-Replication (1)
- DNA-replication (1)
- DNS-Bindungsproteine (1)
- DSMA1 (1)
- DUB (1)
- Daidzein (1)
- Darmkrebs (1)
- Dendritische Zelle (1)
- Dendritische Zellen (1)
- Differentiation (1)
- Dihydroisochinolinderivate (1)
- Dihydroisochinolinonderivate (1)
- Disease (1)
- Distinct (1)
- Elongation (1)
- Endosom (1)
- Endothelial Cell-Cell Contacts (1)
- Endotheliale Zell-Zell-Kontakte (1)
- Enzym (1)
- Enzyme (1)
- Eotaxin (1)
- Eukaryoten (1)
- Exons (1)
- FAM104A (1)
- FAM104B (1)
- FLIP (1)
- FLJ14775 (1)
- FLJ20434 (1)
- FMR1 (1)
- FMR2 (1)
- FMRP (1)
- FRAP (1)
- FXR1 (1)
- FXR2 (1)
- Factor gene PRPF31 (1)
- Fluorkohlenwasserstoffe (1)
- Fragiles-X-Syndrom (1)
- G-Protein-gekoppelter Rezeptor (1)
- G-Proteine (1)
- G-protein-coupled receptor (1)
- G-quadruplex motifs (1)
- G3BP (1)
- GBM (1)
- GLV-1H68 (1)
- Geminin (1)
- Gen notch (1)
- Genanalyse (1)
- Gene Expression (1)
- Gene-expression (1)
- Genes (1)
- Genexpressionsmaschinerie (1)
- Gliom (1)
- Glioma (1)
- Grad-seq (1)
- HFC245fa (1)
- HHV-6 (1)
- HHV-6A (1)
- HRAS (1)
- Hautuebertragung Lepra (1)
- Hepatitis (1)
- Hepatitis-C-Virus (1)
- Herz (1)
- Heterochromatin Protein 1 (1)
- Hitzeschockproteine (1)
- Homebox gene (1)
- Honigbiene (1)
- Hsc70 (1)
- Human Sodium/Iodide symporter (1)
- Human and murine cancer cells (1)
- Hundetumor (1)
- Hyper-IL-6 (1)
- IF2 (1)
- IGHMBP2 (1)
- IL-4 (1)
- IMA2.1 (1)
- IN-VIVO (1)
- Ifn-gamma (1)
- Immunisierung (1)
- Immunity (1)
- Immunpräzipitationen (1)
- Immunreaktion (1)
- Immunstimulation (1)
- Immunsystem (1)
- Impfung (1)
- In-Vivo (1)
- Initiation der DNA Replikation (1)
- Initiationsproteine der Maus (1)
- Interleukin 13 (1)
- Interleukin 4 (1)
- Interleukin 6 (1)
- Interleukin IL-6 (1)
- Interleukin-4 (1)
- Iron-uptake (1)
- Katalysator (1)
- Kombinationstherapie (1)
- Krebsbildgebung (1)
- LARP7 (1)
- LC3 lipidation (1)
- La Protein (1)
- La protein (1)
- Lepra (1)
- Leukozyt (1)
- Lokalisation (1)
- Lysozym (1)
- Lysozyme (1)
- MCM (1)
- MDSCs (1)
- MLLE domain (1)
- MMP-9 (1)
- MRI (1)
- MRI reporter (1)
- MVA (1)
- MYC (1)
- Macromolecular Assembly (1)
- Macromolecular Complex (1)
- Macromolecular Crystallography (1)
- Makromolekül (1)
- Malignant effusion (1)
- Maschine (1)
- Masern Virus (1)
- Masernvirus (1)
- Megakaryocytes (1)
- Megakaryozyt (1)
- Megakaryozyten (1)
- Melanom (1)
- Melanoma B16 (1)
- Messenger-RNP (1)
- Metabolismus (1)
- Metabonomix (1)
- Methylierung (1)
- Mice (1)
- Microarray (1)
- Mitomycin C (1)
- Molecular Chaperone (1)
- Molecular Machine (1)
- Molecular neuroscience (1)
- Molekulargenetik (1)
- MscS (1)
- Multiple drug resistance (1)
- Multiples Myelom (1)
- Multiproteinkomplex (1)
- Mutations (1)
- Myc (1)
- Mycobacterium leprae (1)
- Mykobakterien (1)
- Myoferlin (1)
- NA+/I-symporter (1)
- NA/I symporter (1)
- NEDMIAL (1)
- NMR-Tomographie (1)
- Neural precursor cells (1)
- Neuroblastoma (1)
- Neurodevelopmental diseases (1)
- Neurogenese (1)
- OSC (1)
- Oncolysis (1)
- Oncolytic action (1)
- Oncolytic vaccinia virus (1)
- Oncolytic virotherapy (1)
- Onkolytische Virotherapie (1)
- Orc2 (1)
- Origin (1)
- Origin of Recognition (1)
- P-TEFb (1)
- P97 (1)
- PABC1 (1)
- PABP (1)
- PABPC1 (1)
- PAM2 (1)
- PAM2w (1)
- PAR-CLIP (1)
- PAX genes (1)
- PAX-Gene (1)
- PDZ-Domäne (1)
- PDZ-domain (1)
- PGAS (1)
- PP2A (1)
- PRPF31 (1)
- PSD-95 (1)
- Pathogenese (1)
- Pathway (1)
- Pescadillo (1)
- Pflanzen (1)
- Phytoöstrogen (1)
- Phytoöstrogene (1)
- Plastide (1)
- Plastiden (1)
- Platelets (1)
- Plattenepithelkarzinom (1)
- Plättchen (1)
- Pockenviren (1)
- Pol II (1)
- Poly(A) binding protein (1)
- Polypeptidketten bindende Proteine (1)
- Poxviridae (1)
- Prochlorococcus marinus (1)
- Progenitor cells (1)
- Proliferation (1)
- Promotor (1)
- Promotor <Genetik> (1)
- Promotorpolymorphismus (1)
- Protein (1)
- Protein purification (1)
- Protein-Protein-Interaktionen (1)
- Proteinbiosynthese (1)
- Proteins (1)
- Pseudomonas (1)
- Pseudomonas aeruginosa (1)
- Quadruplex-DNS (1)
- RAB GTPases (1)
- RACK1 (1)
- REST (1)
- RNA (1)
- RNA Helicase (1)
- RNA Helikase (1)
- RNA Spleißen (1)
- RNA binding protein (1)
- RNA helicase (1)
- RNA metabolism (1)
- RNA splicing (1)
- RNA-Polymerase (1)
- RNA-binding proteins (1)
- RNA-polymerase-II (1)
- RNS-Ligase (1)
- ROS (1)
- RP11 (1)
- Ratte (1)
- Reaktionsmechanismus (1)
- Reaktive Sauerstoffspezies (1)
- Relaxin (1)
- Reporter gene (1)
- Retinitis pigmentosa (1)
- Retinitis pigmentosa (RP) (1)
- Retinoblastoma Protein (1)
- Retinoic acid (1)
- Retinopathia pigmentosa (1)
- Rezeptor (1)
- Ribonucleoproteine (1)
- Ribozym (1)
- SM proteins (1)
- SMA (1)
- SMARD1 (1)
- SP117 mutation (1)
- STAT (1)
- STAT3 (1)
- Saccharomyces cerevisiae telomeres (1)
- Salmonella-typhimurium (1)
- Schizophrenieerkrankung (1)
- Sekundärstruktur (1)
- Signalweg (1)
- Small angle X-ray scattering (1)
- Somatostatin (1)
- Somatostatinrezeptor Subtyp 4 (1)
- Spectrin (1)
- Spektrin (1)
- Spinale Muskelatrophie (1)
- Spleißen (1)
- Squamous cell carcinoma (1)
- Stat6 (1)
- Stattic (1)
- Stickstoffmonoxid (1)
- Stoffwechsel (1)
- Strahlentherapie (1)
- Struktur (1)
- Substratbindung (1)
- Subunit (1)
- Sugar-transport (1)
- Survival Motor Neuron (1)
- T cells (1)
- T-Lymphozyt (1)
- T-Zellen (1)
- T-cells (1)
- T-lymphocytes (1)
- TDRD3 (1)
- TIAR (1)
- TOP mRNA (1)
- TOP3b (1)
- TRI-SNRNP (1)
- TTF complex (1)
- Talg (1)
- Talganalyse (1)
- Terminal Oligopyrimidine Tract (1)
- Therapie (1)
- Thrombozyt (1)
- Thrombozytopenie (1)
- Tiermodell (1)
- Tissue (1)
- Toxikokinetik (1)
- Toxikologie (1)
- Transfer-RNS (1)
- Transgenic zebrafish (1)
- Transkription (1)
- Translation (1)
- Translationsinitiation (1)
- Translationskontrolle (1)
- Transporter (1)
- Trifluorpropionsäure (1)
- Trithorax (1)
- Tumor detection (1)
- Tumordetektion (1)
- Tumorimmunologie (1)
- Tumortherapie (1)
- Tumour (1)
- Two-Hybrid-System (1)
- UBXD1 (1)
- UKZ (1)
- Ubiquitin (1)
- United States (1)
- UsnRNP (1)
- VASP (1)
- VEGF (1)
- VSD (1)
- Vaccinia Virus (1)
- Vaccinia Virus Replikation (1)
- Vaccinia virus (VACV) (1)
- Vakzinia (1)
- Vascular endothelial Growth Factor (1)
- Ventrikelseptumdefekt (1)
- Virotherapie (1)
- Voronoi tree map (1)
- Wilms tumor (1)
- Wirtsfaktoren Lepra (1)
- X-ray crystallography (1)
- Xenoöstrogene (1)
- YAP5SA (1)
- YnaI (1)
- Zellbiologie (1)
- Zellskelett (1)
- Zellzyklus (1)
- Zellzyklus-Kontrolle (1)
- Zytoskelett (1)
- acute myeloid leukemia (1)
- adaptive immunity (1)
- alleles (1)
- aminocoumarins (1)
- animal model (1)
- animal-model (1)
- antibody production (1)
- antigen expression (1)
- antitumor immune response (1)
- antiviral immunity (1)
- apoptosis (1)
- aquired resistance (1)
- arginine methylation (1)
- arlR (1)
- ascites (1)
- assembly chaperone (1)
- autophagosome formation (1)
- autophagy (1)
- bacteriophage (1)
- binding (1)
- binding sites (1)
- bioluminescence resonance energy transfer (1)
- biomarkers (1)
- bisphenol A (1)
- bladder cancer (1)
- blastemal (1)
- bone morphogenetic protein (BMP) (1)
- boolean modeling (1)
- buparlisib (1)
- c-MYC (1)
- cGMP (1)
- cancer stem cells (CSCs) and differentiation (1)
- cancer therapy (1)
- canine and feline cancer therapy (1)
- canine cancer cell lines (1)
- canine cancer therapy (1)
- canine soft tissue sarcoma (CSTS) (1)
- canine tumor (1)
- carcinoma (1)
- cell biology (1)
- cell carcinoma (1)
- cell cultures (1)
- cell cycle control (1)
- cell migration (1)
- cell-line (1)
- chemical biology (1)
- chromatin (1)
- class I (1)
- clinical trial (1)
- colon cancer (1)
- colorectal (1)
- coloteral cancer (1)
- combination therapy (1)
- comparative genomic hybridization (1)
- complexity (1)
- costimulation (1)
- ctdsp2 (1)
- cyanelle (1)
- cytolysis (1)
- cytoskeleton (1)
- daidzein (1)
- delipidation (1)
- dendritic cells (1)
- density gradient centrifugation (1)
- differential centrifugation (1)
- diversity (1)
- dogs (1)
- dominant-negative (1)
- down regulation (1)
- electron cryomicroscopy (1)
- endoplasmic reticulum (1)
- endothelial growth-factor (1)
- engineered measles-virus (1)
- enzyme (1)
- epithelial-mesenchymal transition (1)
- evolutionary genetics (1)
- expression (1)
- family (1)
- fluorescence imaging (1)
- fluorescence microscopy (1)
- fraxe mental retardation (1)
- gefitinib (1)
- gene-therapy (1)
- genes (1)
- genetic interactions (1)
- genome instability (1)
- genome stability (1)
- genomics (1)
- glioblastoma multiforme (GBM) (1)
- glv-1h68 (1)
- granulophagy (1)
- granulostasis (1)
- gyrase (1)
- haploinsufficiency (1)
- heart (1)
- hepatitis (1)
- hepatitis C virus (1)
- heterochromatin protein 1 (1)
- hey (1)
- histology (1)
- hnscc (1)
- honeybee (1)
- host factors leprosy (1)
- human xenografted mouse models (1)
- humanized tumor (1)
- hydrofluorocarbons (1)
- iNOS (1)
- immunisation (1)
- immunity (1)
- immunoprecipitation (1)
- immunosuppression (1)
- immunotherapy (1)
- immunotherapy of cancer (1)
- immunprecipitations (1)
- in vivo imaging (1)
- in-vitro (1)
- in-vitro propagation (1)
- inhibition (1)
- initiation (1)
- initiation of DNA-replication (1)
- initiation proteins of mouse (1)
- initiator-tRNA (1)
- innate immune system (1)
- interacting proteins (1)
- interaction (1)
- interagierende Proteine (1)
- interleukin-4 (1)
- ionizing radiation (1)
- kidneys (1)
- label-free quantification (1)
- length (1)
- leukocyte (1)
- lines (1)
- living cells (1)
- localization (1)
- luciferase (1)
- lung and intrathoracic tumors (1)
- lung cancer (1)
- lysozyme (1)
- m-RNA (1)
- mRNA-Metabolismus (1)
- macrophages (1)
- magnetic resonance imaging (1)
- males (1)
- malignant pleural mesothelioma (1)
- mass spectrometry (1)
- matrix metalloproteinases (1)
- measles virus (1)
- mechanosensing (1)
- mechanosensitive channels (1)
- melanoma (1)
- membrane (1)
- messenger RNA (1)
- metabolism (1)
- metabonomics (1)
- metastatic tumors (1)
- methionine (1)
- miR-181 (1)
- miR-26b (1)
- miRNA (1)
- miRNS (1)
- mice (1)
- microglia (1)
- microvascular density (1)
- model (1)
- molecular evolution (1)
- molecular imaging (1)
- motile phenotype (1)
- motor-neuron protein (1)
- mouse model (1)
- murine (1)
- mva (1)
- neutrophils (1)
- niedermolekularer Inhibitor (1)
- noncoding RNA (1)
- nonlinear optics (1)
- notch (1)
- novobiocin (1)
- nuclear import (1)
- nude mice (1)
- oncogenic YAP (1)
- oncolytic vaccinia virus (1)
- oncolytic virus therapy (1)
- onkolytische Virustherapie (1)
- onkolytisches Virus (1)
- organellar mapping (1)
- origin (1)
- p97 VCP Cdc48 (1)
- p97/VCP (1)
- pICln (1)
- pancreatic cancer (1)
- panel (1)
- partial purification (1)
- permutation (1)
- peroxisome purification (1)
- pet dogs (1)
- pflanzliche Zellkerne (1)
- phage (1)
- phase transition (1)
- phosphatases (1)
- phytoestrogens (1)
- plant nuclei (1)
- plastids (1)
- polarization (1)
- polymorphism (1)
- positron-emission-tomography (1)
- posttranscriptional gene regulation (1)
- pre-mRNA splicing (1)
- pre-replicative complex (1)
- pre-tRNA Spleißen (1)
- pre-tRNA splicing (1)
- preRC (1)
- prereplicative complex (1)
- prognostic biomarkers (1)
- prognostic relevance (1)
- proliferation (1)
- promoter (1)
- promoter polymorphism (1)
- proppins (1)
- prostate (1)
- prostate cancer (1)
- protein argentine methyltranserase (1)
- protein localization (1)
- protein subunit (1)
- protein-lipid interactions (1)
- protein-protein-interactions (1)
- proteins (1)
- präRC (1)
- quality control (1)
- receptor (1)
- recognition (1)
- regressive (1)
- renal cancer (1)
- replicating adenovirus (1)
- restriction (1)
- retinobalstoma protein (1)
- ribonuclease-P (1)
- ribosome (1)
- ribosome profiling (1)
- ribozyme (1)
- rod degeneration (1)
- rs112587690 (1)
- rs12628 (1)
- sDMA (1)
- sebum (1)
- sebum analysis (1)
- secondary lung tumors (1)
- separation (1)
- sequence (1)
- signaltransduction (1)
- skin transmission leprosy (1)
- small molecule inhibitor (1)
- snRNP (1)
- snRNPs (1)
- somatostatin receptor subtype 4 (1)
- spacer (1)
- spatial proteomics (1)
- splicing defect (1)
- splicing factor (1)
- staphylococcus aureus (1)
- stem Cells (1)
- stem cells (1)
- stromal vascular fraction (1)
- subcutaneous human tumors (1)
- subpopulation (1)
- substrate binding (1)
- supercoiling (1)
- tRNA Ligase (1)
- tRNA Reparatur (1)
- tRNA ligase (1)
- tRNA repair (1)
- target (1)
- terminal differentiation (1)
- terminale Differenzierung (1)
- tissue microarray (1)
- toxicokinetics (1)
- transcription (1)
- translational regulation (1)
- trifluoropropionic acid (1)
- tumor immunology (1)
- tumor microenvironment (1)
- tumor therapy (1)
- two-hybrid-system (1)
- ubiquitin proteasome system (1)
- up-regulation (1)
- vaccination (1)
- vaccinia virus (VACV) (1)
- vaccinia virus replication (1)
- vemurafenib (1)
- viral replication (1)
- viral therapy (1)
- xenoestrogens (1)
- yeast telomerase (1)
- zinc-finger (1)
- ΔNp63 (1)
Institute
- Lehrstuhl für Biochemie (121)
- Rudolf-Virchow-Zentrum (12)
- Theodor-Boveri-Institut für Biowissenschaften (10)
- Graduate School of Life Sciences (9)
- Institut für Molekulare Infektionsbiologie (9)
- Institut für Virologie und Immunbiologie (3)
- Physikalisches Institut (3)
- Comprehensive Cancer Center Mainfranken (2)
- Institut für Klinische Biochemie und Pathobiochemie (2)
- Medizinische Klinik und Poliklinik I (2)
Schriftenreihe
Sonstige beteiligte Institutionen
- CIBSS Centre for Integrative Biological Signalling Studies, University of Freiburg (1)
- Genelux Corporation, San Diego Science Center, 3030 Bunker Hill Street, Suite 310, San Diego, California 92109, USA (1)
- MRB Forschungszentrum für Magnet-Resonanz-Bayern e.V., Am Hubland, D-97074 Würzburg (1)
- Rudolf-Virchow-Zentrum DFG-Forschungszentrum für Experimentelle Biomedizin der Universität Würzburg (1)
The Atg12-Atg5/Atg16L1 complex is recruited by WIPI2b to the site of autophagosome formation. Atg16L1 is an effector of the Golgi resident GTPase Rab33B. Here we identified a minimal stable complex of murine Rab33B(30-202) Q92L and Atg16L1(153-210). Atg16L1(153-210) comprises the C-terminal part of the Atg16L1 coiled-coil domain. We have determined the crystal structure of the Rab33B Q92L/Atg16L1(153-210) effector complex at 3.47 angstrom resolution. This structure reveals that two Rab33B molecules bind to the diverging alpha -helices of the dimeric Atg16L1 coiled-coil domain. We mutated Atg16L1 and Rab33B interface residues and found that they disrupt complex formation in pull-down assays and cellular co-localization studies. The Rab33B binding site of Atg16L1 comprises 20 residues and immediately precedes the WIPI2b binding site. Rab33B mutations that abolish Atg16L binding also abrogate Rab33B association with the Golgi stacks. Atg16L1 mutants that are defective in Rab33B binding still co-localize with WIPI2b in vivo. The close proximity of the Rab33B and WIPI2b binding sites might facilitate the recruitment of Rab33B containing vesicles to provide a source of lipids during autophagosome biogenesis.
Die Infektion mit dem Hepatitis C Virus (HCV) gilt als eine der Hauptursachen für chronische Hepatitiden und führt häufig zu Leberzirrhose und Leberkarzinom. Weltweit sind etwa 200 Millionen Menschen mit diesem Virus infiziert. Die aktuelle Behandlung der Hepatitis C mit Ribavirin und Interferon-alpha ist langwierig, beeinträchtigt durch Nebenwirkungen und führt nur bei einem Teil der Patienten zur Heilung. Aus diesem Grund ist die Entwicklung eines präventiv oder therapeutisch einsetzbaren Impfstoffes gegen HCV-Infektionen sehr wünschenswert. Das hoch attenuierte und in seiner Vermehrungsfähigkeit extrem eingeschränkte modifizierte Vakziniavirus Ankara (MVA) gehört zu den viel versprechendsten Kandidaten für die Entwicklung neuartiger rekombinanter Virusimpfstoffe. Im Rahmen dieser Arbeit sollten erste rekombinante MVA-HCV-Viren auf ihre Eignung als Impfstoffe untersucht werden. Als Zielantigene dienten wichtige virale Strukturproteine, darunter das unter den HCV-Genotypen hoch konservierte Nukleokapsidprotein Core, sowie das Nichtstrukturprotein NS3, welches als regulatorisches Virusprotein im HCV-Replikationszyklus eine wichtige Rolle spielt, untersucht werden. Hierfür wurden die rekombinanten MVA-Viren MVA-P7.5-HCV core (MVA-core) und MVA P7.5-HCV-1-830 (MVA-1-830) eingesetzt, welche für die HCV-Strukturproteine codierende Gensequenzen unter der Kontrolle des Vakziniavirus-spezifischen Promotors P7.5 exprimieren. Zusätzlich wurde ein weiteres rekombinantes Virus MVA-P7.5-HCV-NS3 (MVA-NS3) konstruiert, welches die Gensequenz für das HCV-Nichtstrukturprotein NS3 trägt. Alle Vektorviren erwiesen sich in in vitro Experimenten als genetisch stabil, erlaubten die Produktion der rekombinanten HCV-Antigene in infizierten Zielzellen und waren somit geeignet für in vivo Untersuchungen im Mausmodell. Da HCV-spezifischen CD8+-T-Zellantworten eine wichtige Rolle bei der Ausheilung einer Hepatitis C zugeschrieben wird, sollte insbesondere die Anregung dieser Immunantworten untersucht werden. Dabei zeigte sich, dass bereits eine einmalige Immunisierung mit MVA-core, MVA-1-830 oder MVA-NS3 ausreichend ist, um HCV-spezifische CD8+-T-Zellantworten zu induzieren. Diese CD8+-T-Lymphozyten konnten ex vivo in Epitop-spezifischer Weise zur Interferon-gamma-Synthese stimuliert werden, ließen sich Antigen-spezifisch in vitro expandieren und waren in der Lage, HCV-spezifische Zielzellen zu erkennen und zu lysieren. Zudem konnte eine Steigerung der Immunantworten durch Mehrfachapplikation der MVA-Vakzinen erzielt werden. Im Folgenden gelang es, die HCV-spezifischen CD8+-T-Zellantworten durch kombinierte Applikation der MVA-Vakzinen mit anderen rekombinanten Virusimpfstoffen wie Semliki-Forest-Viren oder Adenoviren, sowie mit Plasmid-DNA weiter zu verstärken. Solche Impfstrategien sind viel versprechend, da sich die gemeinsame Komponente der eingesetzten, unterschiedlichen Vektorvakzinen auf die rekombinanten Antigene beschränkt und eine starke Immunreaktion auf diese Antigene angeregt wird. Die in dieser Arbeit gewonnenen Erkenntnisse erlauben die Schlussfolgerung, dass rekombinante MVA-Vektoren, die HCV-spezifische Antigene produzieren, dafür geeignet sind, um nach Impfapplikation HCV-spezifische zelluläre Immunantworten zu induzieren. Die im Tiermodell erarbeiteten, optimierten Immunisierungsstrategien liefern eine erste Grundlage für weitere Immunisierungsexperimente in Primatenmodellen und zur Planung erster klinischer Studien im Menschen.
Background
ACAM2000, a thymidine kinase (TK)-positive strain of vaccinia virus, is the current smallpox vaccine in the US. Preclinical testing demonstrated potent oncolytic activity of ACAM2000 against several tumor types. This Phase I clinical trial of ACAM2000 delivered by autologous adipose stromal vascular fraction (SVF) cells was conducted to determine the safety and feasibility of such a treatment in patients with advanced solid tumors or acute myeloid leukemia (AML).
Methods
Twenty-four patients with solid tumors and two patients with AML participated in this open-label, non-randomized dose-escalation trial. All patients were treated with SVF derived from autologous fat and incubated for 15 min to 1 h with ACAM2000 before application. Six patients received systemic intravenous application only, one patient received intra-tumoral application only, 15 patients received combination intravenous with intra-tumoral deployment, 3 patients received intravenous and intra-peritoneal injection and 1 patient received intravenous, intra-tumoral and intra-peritoneal injections. Safety at each dose level of ACAM2000 (1.4 × 106 plaque-forming units (PFU) to 1.8 × 107 PFU) was evaluated. Blood samples for PK assessments, flow cytometry and cytokine analysis were collected at baseline and 1 min, 1 h, 1 day, 1 week, 1 month, 3 months and 6 months following treatment.
Results
No serious toxicities (> grade 2) were reported. Seven patients reported an adverse event (AE) in this study: self-limiting skin rashes, lasting 7 to 18 days—an expected adverse reaction to ACAM2000. No AEs leading to study discontinuation were reported. Viral DNA was detected in all patients’ blood samples immediately following treatment. Interestingly, in 8 patients viral DNA disappeared 1 day and re-appeared 1 week post treatment, suggesting active viral replication at tumor sites, and correlating with longer survival of these patients. No major increase in cytokine levels or correlation between cytokine levels and skin rashes was noted. We were able to assess some initial efficacy signals, especially when the ACAM2000/SVF treatment was combined with checkpoint inhibition.
Conclusions
Treatment with ACAM2000/SVF in patients with advanced solid tumors or AML is safe and well tolerated, and several patients had signals of an anticancer effect. These promising initial clinical results merit further investigation of therapeutic utility.
Trial registration Retrospectively registered (ISRCTN#10201650) on October 22, 2018.
Der Kontakt humaner T-Zellen mit dem MV Glykoproteinkomplex interferiert mit der CD3/CD28 stimulierten Aktivierung von PI3/Akt-Kinase Signalwegen. Damit verbunden ist der ineffiziente Transport PH-Domänen-enthaltender Proteine in Membran-rafts, wie der Akt-Kinase und Vav, den Guaninnukleotid-Austauschfaktor von Rho GTPasen. Es konnte gezeigt werden, dass infolge des MV-Kontaktes die CD3/CD28 stimulierte Aktivität der Rho GTPasen Cdc42 und Rac1 inhibiert ist. Dagegen war in MV-behandelten Zellen eine leichte RhoA Aktivierung festzustellen. Rho GTPasen spielen eine kritische Rolle in der Regulation von Zytoskelettorganisation von T-Lymphozyten. Übereinstimmend damit wurde gezeigt, dass der Kontakt mit MV die CD3/CD28 costimulierte Aktivierung und Polymerisation des F-Aktins inhibiert. Damit verbunden ist die reduzierte Fähigkeit MV-behandelter T-Zellen auf Fibronektin- und mit CD3/CD28 Antikörpern-beschichteten Objektträgern zu polarisieren. Die Ausbildung F-Aktin-getriebener morphologischer Veränderungen, wie Filopodien, Lamellipodien und Uropodien, ist drastisch reduziert. Rasterelektronenmikroskopische Auf-nahmen zeigten in nicht-stimulierten und CD3/CD28 costimulierten MV-behandelten T-Zellen einen nahezu kompletten Verlust an Mikrovilli und Lamellipodien. Die Bindung von MV induziert die Dephosphorylierung des F-Aktin–bindenden Proteins Cofilin und der ERM-Proteine. Es konnte demonstriert werden, dass der MV-Kontakt die Ausbildung einer reifen immunologischen Synapse stört. Trotz der morphologischen Veränderungen konjugieren MV-behandelte T-Zellen mit DCs. Die Anzahl MV-behandelter T-Zellen, die mit DCs inter-agieren, ist vergleichbar mit der mock-behandelter T-Zellen. Allerdings zeigt die 3-dimensionale Rekonstruktion der DC/T-Zell-Kontaktzone, dass in MV-behandelten T-Zellen die zentrale Akkumulation und Clusterbildung des CD3-Moleküls gestört ist und keine monozentrische Synapse ausbildet wird. Desweiteren erfolgt die Relokalisation des MTOC in T-Zellen in Richtung der DC unvollständig. Zusammenfassend kann gesagt werden, dass der MV Glykoproteinkomplex mit essentiellen Schritten einer erfolgreichen T-Zell-Aktivierung während der APC/T-Zell-Interaktion interferiert.
Most protein-encoding genes in Eukaryotes are separated into alternating coding and non-coding sequences (exons and introns). Following the transcription of the DNA into pre-messenger RNA (pre-mRNA) in the nucleus, a macromolecular complex termed spliceosome removes the introns and joins the exons to generate mature mRNA that is exported to the cytoplasm. There, it can be interpreted by ribosomes to generate proteins. The spliceosome consists of five small nuclear ribonucleic acids (snRNAs) and more than 150 proteins. Integral components of this complex are RNA-protein particles (RNPs) composed of one or two snRNAs, seven common (Sm) and a various number of snRNP-specific proteins. The Sm proteins form a ring-structure around a conserved site of the snRNA called Sm site. In vitro, Sm proteins (B/B', D1, D2, D3, E, F, G) and snRNA readily assemble to form snRNPs. In the context of the cell, however, two macromolecular trans-acting factors, the PRMT5 (protein arginine methyltransferases type 5) and the SMN (survival motor neuron) complex, are needed to enable this process. Initially, the Sm proteins in the form of heterooligomers D1/D2, D3/B and F/E/G are sequestered by the type II methyltransferase PRMT5. pICln, a component of the PRMT5 complex, readily interacts with Sm proteins to form two distinct complexes. Whereas the first one comprises pICln and D3/B the second one forms a ring consisting of pICln, D1/D2 and F/E/G (6S). It has been found that pICln prevents the premature interaction of snRNAs with the Sm proteins in these complexes and thus functions as an assembly chaperone imposing a kinetic trap upon the further assembly of snRNPs. PRMT5 catalyzes the symmetrical dimethylation of arginine residues in B/B', D1 and D3 increasing their affinity towards the SMN complex. Finally, the SMN complex interacts with the pICln-Sm protein complexes, expels pICln and mediates snRNP assembly in an ATP-dependent reaction. So far, only little is known about the action of PRMT5 in the early phase of snRNP assembly and especially how the 6S complex is formed. Studies of this have so far been hampered by the unavailability of soluble and biologically active PRMT5 enzyme. The composition of the SMN complex and possible functions of individual subunits have been elucidated or hypothesized in recent years. Still, the exact mechanism of the entire machinery forming snRNPs is poorly understood. In vivo, reduced production of functional SMN protein results in the neurodegenerative disease spinal muscular atrophy (SMA). How specific SMN mutations that have been found in SMA patients cause the disease remains elusive, yet, are likely to interfere with either SMN complex stability or snRNP assembly. The aim of this work was to establish an in vitro system to recapitulate the cytoplasmic assembly of snRNPs. This was enabled by the recombinant production of all PRMT5 and SMN complex components as well as Sm proteins in a combination of bacterial and insect cell expression systems. Co-expression of human PRMT5 and its direct interaction partner WD45 (WD-repeat domain 45) in Sf21 (Spodoptera frugiperda 21) insect cells resulted for the first time in soluble and biologically active enzyme. Recombinant PRMT5/WD45 formed complexes with Sm protein heterooligomers as well as pICln-Sm protein complexes but not with F/E/G alone. Also, the enzyme exhibited a type II methyltransferase activity catalyzing the mono- (MMA) and symmetrical dimethylation (sDMA) of Sm proteins B, D1 and D3. Two experimental setups were devised to quantitatively analyze the overall methylation of substrates as well as to identify the type and relative abundance of specific methylation types. Methylation of Sm proteins followed Michaelis-Menten kinetics. Complex reconstitutions and competition of the methylation reaction indicate that 6S is formed in a step-wise manner on the PRMT5 complex. The analysis of the methylation type could be applied to deduce a model of sequential MMA and sDMA formation. It was found that large Sm protein substrate concentrations favored monomethylation. Following a distributive mechanism this leads to the conclusion that PRMT5 most likely confers partial methylation of several different substrate proteins instead of processing a single substrate iteratively until it is completely dimethylated. Finally, the human SMN complex was reconstituted from recombinant sources and was shown to be active in snRNP formation. The introduction of a modified SMN protein carrying a mutation (E134K) present in spinal muscular atrophy (SMA) proved that mutated complexes can be generated in vitro and that these might be applied to elucidate the molecular etiology of this devastating disease.
Using viruses to treat cancer is a novel approach to an age-old disease. Oncolytic viruses are native or recombinant viruses that have the innate or enhanced capability to infect tumour cells, replicate within the tumour microenvironment and subsequently lyse those cells. One representative, the vaccinia virus (VACV), belongs to the orthopoxvirus genus of the Poxviridae family. GLV-1h68, a recombinant and attenuated vaccinia virus devel- oped by the Genelux Corporation, is a member of this family currently being tested in various phase I/II clinical trials under the name GL-ONC1. It has been shown to specif- ically replicate in tumour cells while sparing healthy tissue and to metabolise prodrug at or transport immunological payloads to the site of affliction. Since imaging modalities offer little insight into viral replication deep within the body, and because oncolytic virotherapy is dependent on replication within the target tissue, the need for a monitoring system is evident. Pharmacokinetic analysis of this oncolytic agent was to give insight into the dynamics present in tumours during treatment. This, in turn, would give clinicians the opportunity to monitor the efficacy as early as possible after the onset of treatment, to observe treatment progression and possibly to gauge prognosis, without resorting to invasive procedures, e.g. biopsies. A criteria for viable biomarkers was that it had to be directly dependent on viral replica- tion. Ideally, a marker for treatment efficacy would be specific to the treatment modality, not necessarily the treatment type. Such a marker would be highly detectable (high sen- sitivity), specific for the treatment (high specificity), and present in an easily obtained specimen (blood). Taking this into consideration, the biomarkers were chosen for their potential to be indicators of viral replication. Thus, the biomarkers analysed in this thesis are: the native proteins expressed by the viral genes A27L and B5R, the virally encoded recombinant proteins β-galactosidase, β-glucuronidase, green fluorescent protein (GFP), carboxypeptidase G2 (CPG2) and carcinoembryonic antigen (CEA). Each marker is under the control of one of five different promoters present. All recombinant viruses used in this thesis express A27L, B5R, GFP and β-glucuronidase and all are derived from the parental virus GLV-1h68. In addition to these markers, GLV-1h68 expresses β-galactosidase; GLV-1h181 expresses CPG2. [...]
The formation of macromolecular complexes within the crowded environment of cells often requires aid from assembly chaperones. PRMT5 and SMN complexes mediate this task for the assembly of the common core of pre-mRNA processing small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs). Core formation is initiated by the PRMT5-complex subunit pICln, which pre-arranges the core proteins into spatial positions occupied in the assembled snRNP. The SMN complex then accepts these pICln-bound proteins and unites them with small nuclear RNA (snRNA). Here, we have analyzed how newly synthesized snRNP proteins are channeled into the assembly pathway to evade mis-assembly. We show that they initially remain bound to the ribosome near the polypeptide exit tunnel and dissociate upon association with pICln. Coincident with its release activity, pICln ensures the formation of cognate heterooligomers and their chaperoned guidance into the assembly pathway. Our study identifies the ribosomal quality control hub as a site where chaperone-mediated assembly of macromolecular complexes can be initiated.
Virotherapy using oncolytic vaccinia virus (VACV) strains is one promising new strategy for cancer therapy. We have previously reported that oncolytic vaccinia virus strains expressing an anti-VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) single-chain antibody (scAb) GLAF-1 exhibited significant therapeutic efficacy for treatment of human tumor xenografts. Here, we describe the use of oncolytic vaccinia virus GLV-1h109 encoding GLAF-1 for canine cancer therapy. In this study we analyzed the virus-mediated delivery and production of scAb GLAF-1 and the oncolytic and immunological effects of the GLV-1h109 vaccinia virus strain against canine soft tissue sarcoma and canine prostate carcinoma in xenograft models. Cell culture data demonstrated that the GLV-1h109 virus efficiently infect, replicate in and destroy both tested canine cancer cell lines. In addition, successful expression of GLAF-1 was demonstrated in virus-infected canine cancer cells and the antibody specifically recognized canine VEGF. In two different xenograft models, the systemic administration of the GLV-1h109 virus was found to be safe and led to anti-tumor and immunological effects resulting in the significant reduction of tumor growth in comparison to untreated control mice. Furthermore, tumor-specific virus infection led to a continued production of functional scAb GLAF-1, resulting in inhibition of angiogenesis. Overall, the GLV-1h109-mediated cancer therapy and production of immunotherapeutic anti-VEGF scAb may open the way for combination therapy concept i.e. vaccinia virus mediated oncolysis and intratumoral production of therapeutic drugs in canine cancer patients.
Durch die Spleißreaktion werden nicht-kodierende Sequenzelemente (Introns) aus eukaryotischen Vorläufer-mRNAs entfernt und die kodierenden Sequenzelemente (Exons) miteinander zu einem offenen Leserahmen verbunden. Dieser zentrale Prozessierungsschritt während der eukaryotischen Genexpression wird durch das Spleißosom katalysiert, das aus den vier kleinen nukleären Ribonucleoproteinpartikeln (snRNPs) U1, U2, U4/U6 und U5, sowie einer Vielzahl weiterer Proteinfaktoren gebildet wird. Alle snRNPs besitzen eine gemeinsame ringförmige Kernstruktur, die aus sieben gemeinsamen Sm-Proteinen (SmB/B‘-D1-D2-D3-E-F-G) besteht, die ein einzelsträngiges Sequenzmotiv auf der snRNAs binden. Während sich diese, als Sm-Core-Domäne bezeichnete Struktur in vitro spontan ausbilden kann, erfolgt die Zusammenlagerung in vivo in einem assistierten und hochregulierten Prozess. Dieser ist abhängig von insgesamt mindestens 12 trans-agierenden Faktoren, die in den PRMT5- und SMN-Komplexen organisiert sind. Der PRMT5-Komplex agiert in der frühen Phase der Zusammenlagerung, indem er die Sm-Proteine durch die Untereinheit pICln rekrutiert und die symmetrische Methylierung von Argininresten in den C terminalen Schwänzen von SmB/B‘, SmD1 und SmD3 katalysiert.
Als Resultat dieser frühen Phase befinden sich die Sm-Proteine SmD1-D2-E-F-G und SmB/B‘-D3 in zwei getrennten und durch pICln organisierten Komplexen. Während SmB/B‘-D3-pICln am PRMT5-Komplex gebunden bleibt, existiert der zweite Komplex als freies Intermediat mit einem Sedimentationskoeffizienten von 6S. Diese Intermediate können nicht mit RNA assoziieren, sodass für die Fortsetzung des Zusammenlagerungsprozesses die Interaktion der Sm-Proteine mit pICln aufgelöst werden muss. Dies geschieht in der späten Phase der Sm-Core-Zusammenlagerung, in der die Sm-Proteine vom SMN-Komplex (bestehend aus SMN, Gemin2-8 und unrip) übernommen werden und pICln dissoziiert wird. Dadurch werden die Sm-Proteine für ihre Interaktion mit der snRNA aktiviert und können auf die Sm-Bindestelle transferiert werden, wodurch die Formierung des Sm-Core abgeschlossen wird.
Im Rahmen dieser Arbeit konnten mit Hilfe einer Kombination röntgenkristallographischer und elektronenmikroskopischer Methoden zwei wichtige Intermediate dieses Zusammenlagerungs-prozesses strukturbiologisch charakterisiert werden. Bei diesen Intermediaten handelt es sich um den 6S-Komplex, sowie um ein Sm-Protein-Transferintermediat mit einem Sedimentations-koeffizienten von 8S. In diesem ist der 6S-Komplex an zwei zentrale Untereinheiten des SMN-Komplexes (SMN und Gemin2) gebunden, während pICln den Komplex noch nicht verlassen hat. Der 8S-Komplex stellt daher ein „gefangenes“ Intermediat zwischen der frühen und späten Phase der Zusammenlagerung dar.
Zunächst gelang es eine erste Kristallform des rekombinant hergestellten 8S-Komplexes zu erhalten, die jedoch keine Strukturlösung erlaubte. Durch eine kombinierte Optimierung der Kristallisationsbedingung und der verwendeten Proteine wurde eine weitere ähnliche Kristallform erhalten, mit der die Kristallstruktur des 8S-Komplexes gelöst werden konnte. Die Kristallisation des 6S-Komplexes gelang im Anschluss auf Basis der Hypothese, dass Kristalle beider Komplexe aufgrund der kompositionellen Verwandtschaft zwischen 6S und 8S auch Ähnlichkeiten in der Architektur ihrer Kristallgitter aufweisen könnten. Daher wurden innerhalb von pICln gezielt Aminosäuren substituiert, die sich innerhalb von Kristallkontakten der 8S-Kristalle befanden und konformationell eingeschränkt waren. Mit entsprechend rekonstituierten 6S-Präparationen konnten dann zwei Kristallformen erzeugt werden, die eine Strukturlösung des 6S-Komplexes ermöglichten.
Durch die Kristallstruktur des 6S-Komplexes konnte für pICln eine strukturelle Mimikry der Sm-Proteine identifiziert werden. Diese ermöglicht eine Bindung der Sm-Proteine und eine frühzeitige topologische Organisation des Sm-Pentamers D1-D2-F-E-G in einer geschlossenen hexameren Ringstruktur. Die Kristallstruktur des 8S-Komplexes zeigt, wie der SMN-Komplex über Gemin2 an das Sm-Pentamer bindet. In Kombination mit einer EM-Struktur des 8S-Komplexes gelang es weiterhin, einen plausiblen Mechanismus für die Elimination von pICln und die Aktivierung der Sm-Proteine für die snRNA-Bindung zu formulieren. Somit konnten diese Arbeiten zu einem besseren Verständnis der Funktionen von trans-agierenden Faktoren bei Zusammenlagerung von RNA-Protein-Komplexen in vivo beitragen.
Trotz weltweiter kostenlos zur Verfügung stehender multi drug therapy und Eradikationsbemühungen der WHO liegt die Leprainzidenz seit fünf Jahren bei etwa 250 000 Neuerkrankungen pro Jahr. Der massive Abfall der Prävalenz seit 1985 ist zum einen rechnerisch und durch die Art der Datenerhebung bedingt (s. 5.1.1), zum anderen lässt sie keine Rückschlüsse auf die Transmissionsereignisse, also die Aktivität der Krankheit zu. Dazu dient die Inzidenz, die nur unverhältnismäßig gesunken ist (s. 2.4.1). Für eine effektive Bekämpfung der Lepra muss jedoch eine Reduktion der Neuerkrankungen erreicht werden. Bekannt ist, dass nur ein Bruchteil der mit M.leprae exponierten Individuen eine manifeste Krankheit entwickelt. Die Suche nach Wirtsfaktoren für eine Lepraerkrankung ist für gezielte Präventions- und Prophylaxe-Maßnahmen, die Neuerkrankungen verhindern sollen, demnach von großer Bedeutung. In der vorliegenden Arbeit werden die Ergebnisse einer Literaturrecherche zum Thema "Talglipide als Wirtsfaktoren für M.leprae" präsentiert und eine Methode zur Talganalyse entwickelt. Anhand wissenschaftlicher Publikationen wurde der aktuelle Stand der Forschung in den verschiedenen Bereichen dieser Hypothese reviewartig dargestellt. Der aktuelle Erkenntnisstand hinsichtlich der Lepraübertragung ist vereinbar mit mehreren Übertragungswegen, wobei die Tröpfchen- und die Hautübertragung favorisiert werden (s. 2.5.1). Die Interpretation der Genomanalysen von M.leprae hat in Kombination mit früheren biochemischen Erkenntnissen Aufschluss über die metabolischen Fähigkeiten von M.leprae gegeben. M.leprae besitzt ein reduktives "Minimalgenom", das sich an die intrazelluläre Nische, in der es lebt, außerordentlich adaptiert hat. Der Verlust wichtiger Kohlenstoffquellen und eine stark eingeschränkte Atmungskette stehen im Gegensatz zu den fast vollständig erhaltenen anabolen und katabolen Stoffwechselwegen der Lipide. Sowohl für die Zellwandsynthese als auch zur Energieproduktion ist M.leprae auf wirtsbezogene Lipide angewiesen. Freie Fettsäuren werden dabei veresterten Fettsäuren vorgezogen (s. 5.2.1.1). Epidemiologische Erkenntnisse stehen ebenfalls in Einklang mit unserer Lipidhypothese. Als Ursache für das Clustering von Leprafällen in Haushalten kommen sowohl genetische als auch zufällig verteilte Faktoren sowie ein auf den gesamten Haushalt wirkender "Haushaltsfaktor" in Frage. Als genetischer Faktor, der die Talglipidzusammensetzung beeinflusst, wären Enzymaktivitäten für die Squalen- bzw. Sapiensäuresynthese denkbar (vgl. 5.2.1.3). Einen in der Bevölkerung zufällig verteilten Suszeptibilitätsfaktor könnte die residente Keimflora der Haut darstellen, die für die Menge der im Talg vorkommenden freien Fettsäuren verantwortlich ist (s. 5.2.1.2). Als möglicher Haushaltsfaktor kommt "Armut" in Betracht, der nachgewiesenermaßen mit schlechter Körper- und Kleidungshygiene einhergeht (s. 5.2.2.3). In Kombination mit einer vermutlich ebenfalls mit Armut assoziierten häufigeren kutanen Verletzung durch Parasiten und Mücken könnte dies eine kutane Schmierinfektion mit M.leprae begünstigen. Für eine Schmierinfektion über kontaminierte Gegenstände spricht auch die gute extrakorporale Überlebensfähigkeit des Erregers und der Nachweis von M.leprae in Bodenproben (s. 5.2.2.2). Die epidemiologischen Daten zu Geschlechterverhältnis und Infektionszeitpunkt lassen ebenfalls eine Rolle der Talglipide als Wirtsfaktoren für eine Lepraerkrankung vermuten (s. 5.2.1.2). Auf Basis der Erkenntnis, dass Lipide und insbesondere Talglipide als Wirtsfaktoren für M.leprae in Betracht kommen, wurde zu diesbezüglich relevanten Talgkomponenten recherchiert. Als trophischer Wirtsfakor kommen die individuell in unterschiedlichen Mengen vorliegenden freien Fettsäuren des Sebums in Betracht. Die Menge an Squalen und Sapiensäure im Talg hat nachgewiesenermaßen erheblichen Einfluss auf die Barrierefunktion der Haut gegen bakterielle Erreger (s. 5.2.1.3). Es wurde folglich eine auf Dünnschicht- und Gaschromatografie beruhende Methode zur Quantifizierung dieser Talgbestandteile entwickelt (s. 4.6). Die Probenentnahme erfolgt mittels Sebutape, was eine bewährte, reproduzierbare und auch unter tropischen Bedingungen leicht anwendbare Methode darstellt.